10.3760/j.issn:1001-7097.2005.09.004
饰胶蛋白聚糖对大鼠肾系膜细胞生长的抑制作用及其信号转导途径的研究
目的探讨饰胶蛋白聚糖(DCN)对大鼠系膜细胞(MsC)生长的抑制作用及其信号转导分子MAPKs和p21表达的影响.方法经脂质体介导将DCN基因转染体外培养的大鼠MsC,筛选和鉴定后,收集阳性细胞克隆的培养上清(DCN上清),将其加入正常MsC的培养液中,采用流式细胞仪检测细胞周期.用Western印迹法分别检测MAPKs,包括细胞外调节激酶(ERK)1/2、应激活化蛋白激酶(SAPK)/氨基末端激酶(JNK)和p38和p21蛋白表达;用免疫荧光法观察p21在细胞中的表达.结果DCN上清明显抑制正常MsC的增殖,G2-M期细胞数明显减少,仅为对照组的35%(P<0.05);磷酸化ERK1/2及SAPK/JNK表达增强,分别为对照组的2.2倍、1.4倍及1.7倍、1.8倍;磷酸化p38无明显变化.DCN抗体呈浓度依赖性抑制磷酸化ERK1/2、SAPK/JNK的表达上调.DCN上清还可使细胞p21的表达明显增强,而DCN抗体也同样呈浓度依赖性地抑制其上调表达的作用,ERK1/2及SAPK/JNK通路抑制剂U0126和circumin均可抑制其上调表达的作用,分别为对照组的64%和61%;而p38通路抑制剂SB203580则对其无影响.结论DCN对肾MsC的生长有抑制作用,其机制可能经ERK1/2、SAPK/JNK和p21蛋白介导.
蛋白聚糖类、信号转导、丝裂素激活蛋白激酶、p21、系膜细胞
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R6(外科学)
国家自然科学基金30170431
2005-10-20(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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