一氧化氮参与铁负荷肾小管细胞毒作用的机制及其防治

摘要：

目的探讨一氧化氮(NO)参与铁负荷肾小管细胞毒作用的可能机制,评价氧自由基清除剂在铁肾小管细胞毒中的防治作用及其与NO的关系.方法在建立原代鼠肾近端小管上皮细胞培养体系的基础上,以孵育液中NO2-产量(Griess反应)和小管细胞乳酸脱氢酶(LDH)释放率改变为线索,比较不同剂量铁剂、各氧自由基清除剂、L精氨酸(L-Arg)和CO合成酶抑制剂,左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME)分别作用12h后在非脂多糖(LIS)组和LPS组(10μg/ml)中对小管细胞毒作用及与NO代谢的影响;同时用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测不同剂量铁剂与LPS的联用下诱导型一氧化氮合酶(iNOS)mRNA的表达改变.结果NTA-Fe可以剂量依赖的方式同步增加LDH释放(P＜0.001)及孵育液中NO2-的产量(P＜0.001);但在LPS组中细胞毒作用的增加(P＜0.001)并不伴随N02-的明显改变(P＞0.05).LPS诱导的iNOS转录上调可为NTA-Fe增强,但仅限于500μmol/L(P＜0.01).在LPS组中,加入L-精氨酸及不同剂量L-NAME可分别加重和缓解铁的细胞毒作用;然而,L-NAME的防护作用在铁剂组中并不明显;OH清除剂可防护铁的毒作用(P＜0.001),但NO2-水平的相应下降仅见于二甲基硫脲(DMTU)作用的LPS组中(P＜0.05).结论在肾小管上皮细胞中,NO可促进NTA-Fe的细胞毒作用;一定浓度范围内铁可增强LPS诱导的iNOS转录上调;OH是NTA-Fe细胞毒作用的主要介质;NO的参与很可能是通过与O2-和H2O2的相互作用及促进Fenton反应,生成高反应活性的OH及或ONOO-.

关键词：细胞毒作用、一氧化氮、氧自由基、肾近端小管细胞

所属期刊栏目：16

分类号：R6(外科学)

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：177-181