复方肃毒星提取物抑制乙型肝炎病毒cccDNA的作用

摘要：

目的 研究复方肃毒星提取物(简称肃毒星)体外对乙型肝炎病毒(HBV)复制模板共价闭合环状DNA(cccDNA)的抑制作用.方法 通过细胞计数试剂盒CCK-8检测肃毒星在恩替卡韦耐药HBV稳定复制细胞系(HepG2.A64)、野生HBV稳定复制细胞系(HepG2.2.15和HepAD38)以及肝癌细胞系(HepG2)中的毒性作用;选择安全有效的高、中、低浓度肃毒星分别处理3个细胞系,采用实时荧光定量PCR法检测细胞内HBV cccDNA水平.以高斯荧光素酶微环cccDNA(mc-cccDNA)转染HepG2细胞,同时选择高、中、低浓度的肃毒星在不同时间点作用转染mc-cccDNA的HepG2细胞,荧光素酶检测试剂盒分析相对荧光强度,计算对cccDNA的抑制率,评价cccDNA转录活性.结果 肃毒星在HepG2.A64、HepG2.2.15、HepAD38和HepG2细胞中的半数毒性浓度分别为27.01μg/ml、29.36μg/ml、31.20μg/ml和52.80μg/ml.肃毒星对HepG2.A64、HepG2.2.15和HepAD38细胞中HBV cccDNA有抑制作用,最佳作用时间为5 d,5 d最大抑制率分别为(84.24±2.1)％、(52.02±4.74)％和(47.16±6.69)％,与未用药处理组差异有统计学意义(P均<0.05).肃毒星对转染HepG2细胞后mc-cccDNA转录活性的最佳抑制率为(48.44±4.54)％,抑制作用优于干扰素对照组(P<0.05),略弱于特异性敲低mc-cccDNA的pLV-CRISPR处理对照组(P<0.05),差异有统计学意义.结论 肃毒星对恩替卡韦耐药型和野生型细胞系HBV cccDNA的复制及转录均有很好的抑制作用,为慢性乙型肝炎功能学治愈新药的开发提供参考.

关键词：肝炎病毒、乙型、共价闭合环状DNA、肃毒星提取物、转录活性

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资助基金：国家自然科学基金面上项目;国家自然科学基金重点项目

在线出版日期：2020-09-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：265-271