10.3760/cma.j.cn112866-20230711-00002
F磁珠对血液样本中EB病毒的富集方法
目的:设计表达一种全新的重组蛋白(重组Ficolin-2蛋白,F蛋白)并包被磁珠,实现多种抗凝血中EB病毒的富集效果。方法:通过体外基因合成重组F蛋白基因片段,该片段包括人IL-2信号肽、his标签、人IgG1 Fc、人Ficolin-2颈区及纤维蛋白原样区域(fibrinogen-like domain, FGD);并整合进表达质粒pCDNA?3.1(+)载体中,通过转染HEK293F细胞,实现上清中的分泌表达;通过镍柱纯化蛋白后包被到蛋白A磁珠上构建F磁珠;最后,收集三种不同抗凝剂(分别为ETDA、肝素、柠檬酸钠)抗凝的临床EB病毒血样本,并且比较了F磁珠和课题组前期开发的重组甘露聚糖结合凝集素磁珠(M磁珠)对三种抗凝剂抗凝血液中EB病毒富集的效果。结果:M磁珠对肝素和柠檬酸钠抗凝血液中EB病毒富集效果均较好(
P<0.01),但是对EDTA抗凝血EB病毒没有富集作用;而F磁珠对三种抗凝血中EB病毒的富集效果均较好(
P<0.01)。
结论:F磁珠可以实现多种抗凝血中EB病毒的富集作用。
F磁珠、EB病毒检测、M磁珠
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国家重点研发计划2021YFC2301100;The National Key R&D Program of China2021YFC2301100
2024-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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