10.3760/cma.j.cn112866-20210618-00099
SFTS病毒、登革病毒、汉滩病毒快速荧光定量RT-PCR检测方法的建立及评价
目的:建立针对发热伴血小板减少综合征病毒(severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)、登革病毒(dengue virus, DENV)、汉滩病毒(hantaan virus,HTNV)三种常见病毒性出血热病毒的现场应急快速检测方法。方法:基于传统的TaqMan荧光探针技术,利用国产快速一步法RT-PCR试剂盒,结合magnetic induction cycler (Mic) qPCR仪,建立三种常见病毒性出血热病毒的快速荧光定量RT-PCR检测方法。利用三种病毒体外转录RNA及模拟样本、其他相关病毒临床样本及健康人血标本进行灵敏度、特异性、重复性验证。结果:相较于传统的实时荧光定量RT-PCR方法,此方法所需时间大大缩短,可在35 min内完成检测。SFTSV、DENV、HTNV的最低检出限均小于100拷贝/PCR,与模拟对照样本及其他病毒临床样本无交叉反应,模拟阳性样本验证均可检出,且各组验证结果的
Ct值变异系数均小于4%。
结论:本研究建立的快速荧光定量RT-PCR检测方法具有良好的灵敏性、特异性和重复性。对于现场应急检测和媒介生物标本筛查具有一定的应用前景。
发热伴血小板减少综合征病毒、登革病毒、汉滩病毒、快速荧光定量RT-PCR
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传染病防治重大专项2018ZX10711-001;2017ZX10303404-007-002;China Mega-project for Infectious Disease2018ZX10711-001;2017ZX10303404-007-002
2023-05-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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