基于流式探针法的丙型肝炎病毒特异的B细胞检测与全人源中和抗体发现

摘要：

目的:探讨流式探针法在分析、分选丙型肝炎病毒(hepatitis C virus, HCV)特异性B细胞以及全人源单克隆抗体发现中的作用。方法:采用伯胺标记法制备HCV特异性探针；使用流式细胞术检测和分选HCV特异B细胞，并体外通过单个B细胞抗体克隆技术从分选的HCV特异性B细胞中克隆表达抗体；应用ELISA技术和假病毒中和试验检测抗体的结合活性以及中和活性。结果:探针法能有效地检测HCV特异的记忆性B细胞，HCV患者探针阳性细胞频率明显高于正常人(U＝0.0004,
P <0.0001)。通过单细胞分选HCV特异的记忆性B细胞，体外克隆表达获得6个单克隆抗体，其中有5个与HCV膜蛋白具有结合活性，2个显示具有较强中和活性。
结论:伯氨标记法制备HCV特异性探针是一种简单高效的探针制备方法，结合流式细胞术可用于HCV特异B细胞的检测以及分选。

关键词：丙型肝炎病毒、中和抗体、探针、疫苗、记忆性B细胞

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资助基金：郴州市第一人民医院院内重点项目N2019-002;郴州市科技局一般课题zdyf201920，zdyf201921;郴州市第一人民医院优秀青年基金N2020-4;Key Project of The First People′s Hospital of ChenzhouN2019-002;General Project of Chenzhou Science and Technology Bureauzdyf201920, zdyf201921;Outstanding Youth Fund of the First People′s Hospital of ChenzhouN2020-4

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：649-654