建立快速检测委内瑞拉马脑炎的RT-LAMP技术

摘要：

目的 利用逆转录-环介导等温扩增技术(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)建立快速检测委内瑞拉马脑炎病毒(Venezuelan equine encephalitis virus, VEEV)的方法.方法 针对VEEV nsp1基因序列,设计了5套特异性引物进行筛选,再对反应温度进行优化,最后进行特异性、灵敏性及重复性评价.结果 RT-LAMP检测VEEV的最适温度在65℃;同时选取11种病毒进行RT-LAMP,证明了RT-LAMP具有高特异性;运用RT-qPCR与RT-LAMP 对比灵敏性,结果表现为RT-LAMP检测的灵敏性超RT-qPCR检测的100倍.针对VEEV进行RT-LAMP的重复性实验,结果为具有较好的重复性.结论 RT-LAMP检测VEEV法具有简单快速高效的特点,且装置简单,特异性强、灵敏性高、重复性好.

关键词：委内瑞拉马脑炎病毒、环介导等温扩增、快速检测、nsp1基因

所属期刊栏目：34

资助基金：国家重大科技专项;国家重点研发计划项目;National Major Science and Technology Project ;National Key Research and Development Program of China

在线出版日期：2020-04-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：78-82