毒胡萝卜素通过ATF6途径促进柯萨奇病毒B3复制的初步研究

摘要：

目的 探讨内质网应激诱导剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)对柯萨奇病毒B3(coxsachievirus B3,CV-B3)病毒复制的影响.方法 将10个MOI的病毒感染HeLa细胞后,在病毒的吸附和补液过程中加入0.25μmol/L的TG,分别在药物刺激的3 h、6 h和9 h收集病毒感染的样品.通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测CV-B3病毒复制效率;分别使用0.25μmol/L、0.08μmol/L和0.025μmol/L的TG刺激CV-B3病毒感染细胞,通过噬斑形成试验进一步验证TG对病毒复制的影响;通过内质网应激3条通路的抑制剂分别作用于TG刺激的病毒感染细胞,通过qRT-PCR检测病毒量的变化.结果 qRT-PCR结果显示,TG刺激后,相对于对照,病毒量在3 h没有发生明显的变化;在病毒感染的6 h和9 h,病毒量分别增加了2.5倍和158.6倍.噬斑形成试验显示,TG作用后,病毒的噬斑明显增大.通过加入内质网应激的3条通路PERK、ATF6和IRE1的抑制剂GSK2656157、AEBSF和STF-083010发现,加入ATF6的抑制剂AEBSF 6 h后,病毒增加量下降了90％;AEBSF作用9 h后,病毒增加量下降了55％.结论 TG能够通过ATF6途径诱导内质网应激并有效的促进CV-B3病毒的复制.

关键词：CoxsacievirusB3、毒胡萝卜素、内质网应激、噬斑、ATF6通路

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资助基金：国家重大科技专项2018ZX10102001, 2018ZX10711001,2018ZX10734404;传染病预防控制国家重点实验室发展基金2011SKLID104;China Mega-Project for Infectious Disease 2018ZX10102001, 2018ZX10711001, 2018ZX10734404 , the SKLID Development Grant2011SKLID104

在线出版日期：2019-07-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：244-247