HBV共价闭合环状DNA Real-time PCR检测方法比较

摘要：

目的 比较HBV共价闭合环状DNA (Covalently closed circular DNA,cccDNA) Real-time PCR检测方法.方法 选择文献中常用的普通Taq-Man探针及Taq-Man MGB探针两种检测方法,合成引物及探针,制备质粒标准品,提取乙肝患者血清及肝组织标本HBV DNA,分别用质粒安全ATP依赖的DNA酶(Plasmid-safe ATP-dependent DNase,PSAD)酶切,进行敏感性、特异性及重复性检测验证.结果 两种检测方法扩增质粒标准品均有良好线性关系(R20.989和0.976),重复性良好(CV＜4％);检测PSAD酶切前后质粒、血清及肝组织HBV cccDNA均有良好特异性;检测相同浓度样品时普通Taq-Man探针Ct值较Taq-Man MGB探针略低.结论 两种方法均可用于HBV cccDNA检测,本实验所用的普通Taq-Man探针较Taq-Man MGB探针敏感性略高;MGB探针本底更低.实际工作中可根据需求选择适宜的探针.

关键词：肝炎病毒、乙型、共价闭合环状DNA(cccDNA)、Real-time PCR

所属期刊栏目：31

分类号：R512.6;S852.611;U458.1

在线出版日期：2017-03-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：71-74