10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2016.01.021
人乳头瘤病毒 HPV33型 E6 E7蛋白的表达及多克隆抗体的制备
目的:表达人乳头瘤HPV33型病毒癌蛋白E6E7,并免疫小鼠制备抗体。方法从HPV33型基因组中扩增出E6 E7的基因片段,通过基因测序加以证实;将其克隆至原核表达载体pET28a中,在大肠埃希菌中经IPTG诱导表达,经HIS亲核层析对重组蛋白进行纯化,收集重组蛋白免疫的小鼠阳性血清,经ProteinA/G亲核层析柱纯化得到多克隆抗体,同时将E6 E7克隆至真核表达载体pCDNA3.1/His C中,转染293细胞,分别采用免疫荧光法和Western Blot检测抗体的特异性。结果用得到高纯度的重组蛋白E6、E7制备的多克隆抗体,具有良好的特异性。结论这种高纯度重组E6、E7蛋白和抗体有望用于HPV33型人乳头瘤疾病的临床检测及发生机制的研究。
宫颈肿瘤、人乳头瘤HPV33、E6E7蛋白、多克隆抗体
R37;R73
国家自然科学基金项目81403031@@@@sNational Natural Science Foundation of China81403031
2016-04-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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