轮状病毒疫苗株VP8*核心区蛋白的表达和纯化

摘要：

目的 为了研究轮状病毒疫苗株VP8*蛋白的功能和结构特征,利用原核表达系统纯化得到VP8 *核心区蛋白(VP8* core,64-223位氨基酸).方法 从口服疫苗中提取兰州疫苗株LLR病毒核酸,RT-PCR得到目的片段,克隆到pET30a载体中构建重组质粒.根据已合成的Rotateq和Rotarix P[8] VP8*全长基因,PCR得到VP8*核心区片段,克隆到pET30a载体构建重组质粒.重组质粒转化大肠埃希菌BL21(DE3)进行蛋白表达.利用HistrapHP和superdex200纯化柱,通过亲和层析和分子筛层析纯化得到目的蛋白.结果 VP8*核心区蛋白以可溶形式表达,并通过纯化得到较纯的VP8* core蛋白,聚丙烯酰氨凝胶电泳(SDS-PAGE)显示相对分子质量约为20 kDa.结论 成功构建了pET30a-VP8* core重组质粒,得到轮状病毒各疫苗株VP8* core蛋白,为研究疫苗株受体结合特征以及疫苗评价提供了基础和参考.

关键词：轮状病毒属、疫苗株、VP8*核心区蛋白、蛋白表达

所属期刊栏目：29

分类号：R3;S852.659.4;Q784

资助基金：国家自然科学基金81472003

在线出版日期：2016-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：543-546