人巨细胞病毒UL138含多个B细胞表位病毒样颗粒的构建及鉴定

摘要：

目的 利用毕赤酵母系统表达HPV16 L1-HCMV UL138含多个B细胞表位片段的嵌合病毒样颗粒,并评价其免疫效应.方法 选择富含B细胞表位的HCMV UL13896-138片段,构建毕赤酵母真核表达质粒pPIC3.5K/HPV16L1/UL13896-138.线性化后的重组质粒电转化GS115毕赤酵母,甲醇诱导HPV16 L1/UL13896-138蛋白表达,采用肝素亲和层析法纯化嵌合VLPs,并加以鉴定.将纯化的嵌合VLPs免疫BALB/c小鼠,通过ELISA检测免疫小鼠血清的UL138特异性抗体水平.结果 经PCR、酶切和测序分析表明成功构建了pPIC3.5K/HPV16 L1/UL13896-138嵌合重组质粒.经甲醇诱导后,SDS-PAGE和Western Blot证实重组酵母菌裂解产物存在目的蛋白.肝素亲和纯化后,透射电镜观察到了直径大约55nm的病毒样颗粒.免疫小鼠血清的ELISA结果显示,HPV16 L1-HCMV UL138B细胞表位嵌合病毒样颗粒能诱导小鼠产生较高水平的UL138特异性IgG抗体.结论 以HPV16 L1为载体,利用整合型重组毕赤酵母表达系统成功制备了HCMV UL138含多个B表位片段的嵌合病毒样颗粒,免疫小鼠可产生较高水平的体液免疫反应.

关键词：人巨细胞病毒、病毒样颗粒、疫苗

所属期刊栏目：29

分类号：R373;R725;Q786

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金;温州市科技局项目

在线出版日期：2016-05-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：488-492