10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2015.05.016
A组轮状病毒疫苗株LLR VP8*基因的原核表达及纯化
目的 表达A组轮状病毒疫苗株LLR的VP8*蛋白,为深入研究LLR的功能特性奠定基础.方法 从兰州生物制品所生产的A组轮状病毒疫苗中提取病毒RNA为模板,经过RT-PCR反应获得轮状病毒LLR株VP8*基因的cDNA片段,将其克隆到pGEX-4T1表达载体中构建重组质粒pGEX-4T1-VP8*,测序正确后转化大肠埃希菌BL21(DE3),通过SDS-PAGE电泳、免疫印迹方法检测IPTG诱导表达后的产物,用Glutathione Sepharose 4B纯化目的蛋白.结果 SDS-PAGE电泳可见大小约为52 000的融合蛋白,Western-Blot显示该蛋白能与GST标签抗体结合.结论 成功构建了包含LLR株VP8*序列的重组表达载体pGEX-4T1-VP8*,获得了可溶性GST-VP8*重组蛋白.
轮状病毒属、L-LR、VP8*蛋白
29
S511;S;S852.659.4
国家自然科学基金81472003
2015-11-25(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
共3页
452-454