戊型肝炎病毒ORF2的构建表达和纯化

摘要：

目的 获取有免疫原性的戊肝抗原蛋白,探讨其作为诊断试剂的应用价值.方法 经密码了优化后人工合成戊型肝炎病毒(HEV) HEV-ORF2(aa 368-607)基因,克隆入表达载体pET43a中,构建重组表达质粒pET43a-HEV并进行原核表达;经阴离子交换纯化后通过Western Blotting和ELISA鉴定该蛋白.结果 酶切鉴定及测序结果均显示表达质粒构建正确;SDS-PAGE电泳结果显示该蛋白与预期相对分子质量大小一致;Western Blotting和ELISA结果显示该蛋白能与戊肝抗体特异性结合.结论 成功获取了纯度很高且有生物活性的戊肝抗原蛋白,为研制新型检测试剂盒提供理论基础和方案.

关键词：蛋白质工程、离子交换、肝炎,戊型

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资助基金：艾滋病与病毒性肝炎等重大传染病防治国家十二五科学技术重大专项子课题五2012ZX10002001-005

在线出版日期：2015-05-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：171-173