Tat融合蛋白表达载体TAT-SOX2的克隆化及蛋白表达研究

摘要：

目的 构建重组表达载体TAT-SOX2,在E.coli BL21中高效表达并纯化融合蛋白.方法 经PCR获得编码人SOX2的全基因序列,连接到原核表达载体PET-28b-TAT-V2上,得到重组表达载体TAT-SOX2,转化大肠埃希菌,IPTG诱导TAT-SOX2融合蛋白的表达.表达产物用SDS-PAGE鉴定,亲和层析柱纯化融合蛋白,并应用Western Blot检测蛋白的特异性,应用免疫荧光检测融合蛋白转导HSF细胞的效果.结果 成功构建了TAT-SOX2融合蛋白的原核表达载体,在诱导下获得了高效表达并纯化了融合蛋白,Western Blot鉴定正确.免疫荧光提示融合蛋白可快速转导入HSF细胞内.结论 为进一步的通过蛋白转导方式诱导多能干细胞提供了物质基础.

关键词：蛋白质 SOX2、干细胞、蛋白质转运

所属期刊栏目：28

分类号：R392.11;S641.3;R743.3

资助基金：军队十二五重大课题BWS11J075

在线出版日期：2014-11-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：352-354