应用In-Fusion技术构建HBV基因组全长重组质粒及序列分析

摘要：

目的 研究In-Fusion技术在HBV全进组克隆中的应用,并分析所获得的的序列信息.方法 在浙江杭州地区收集23份慢性乙型肝炎患者血清,提取病毒核酸,分别设计PCR引物扩增病毒基因组和pMD18T载体,采用In-Fusion方法构建基因组测序质粒,并对序列进行分析.结果 成功扩增出了23条HBV基因组序列,向NCBI提交的24株HBV全长序列,测序结果分析显示,B基因型11例,C基因型12例,没有B+C型,发现YMDD耐药株1例.结论 In-Fusion技术构建重组质粒是一种高效的连接方法,提高了连接率与成功率,可以大大简化目的片段与载体的连接,有效避免了在连接过程中常见的载体自连现象,探索了该技术在HBV序列研究中的初步应用.本研究丰富了我国的HBV全长基因组数据库,为HBV基因组特点、变异、药物、疫苗研究以及乙型肝炎的个体化治疗提供了参考依据.

关键词：肝炎病毒,乙型、克隆,分子、基因

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资助基金：十二五国家重大专项2012ZX10002001-005

在线出版日期：2014-05-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：111-113