三种不同转染方法拯救病毒的比较研究

摘要：

目的 比较3种不同转染方法,探索最佳的拯救病毒策略.方法 3种转染方法包括:①含T7 RNA聚合酶启动子的全长肠道病毒71(EV71)感染性质粒(P-EV71)和T7RNA聚合酶真核表达质粒(VR-1a)共转染Vero细胞;②含T7RNA聚合酶启动子的EV71全长基因片段(PCR产物)与VR-1a共转染Vero细胞;③利用体外转录技术得到EV71病毒全长RNA,直接转染Vero细胞.分别观察3种方法转染后产生细胞病变效应(CPE)时间及病变情况,用RT-PCR扩增拯救病毒核酸,测序验证其正确性,用蛋白印迹方法检测拯救病毒抗原.结果 3种方法均可成功转染Vero细胞得到拯救病毒,三种转染方法转染效果比较:方法③优于②、②优于①.结论 三种转染方法均可成功拯救EV71病毒,以病毒RNA直接转染效果最好.

关键词：RNA、肠道病毒属、转染

所属期刊栏目：27

分类号：R392-33;S852.65;R735.3

资助基金：国家自然科学基金81271846

在线出版日期：2014-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：486-488