四种SSB蛋白的表达纯化及其对HCV RNA的绑定分析

摘要：

目的 表达和纯化四种单链DNA结合(SSB)蛋白,并探讨其对HCV RNA的绑定.方法 构建四种SSB蛋白的表达质粒,各简写为TTH,SSOB,KOD和BL21.TTH转化BL21 (DE3)感受态细胞,SSOB,KOD和BL21分别转化Transetta(DE3),IPTG诱导表达.镍柱亲和层析纯化,经SDS-PAGE检测表达纯化后的SSB蛋白.并通过TAE电泳检测其对HCV RNA的绑定情况.结果 四种SSB蛋白表达质粒转入合适的感受态细胞,IPTG诱导,纯化后经SDS-PAGE电泳,分别发现单一预期大小的蛋白条带,说明我们成功表达纯化出较高纯度的SSB蛋白.并与HCV RNA孵育后,经TAE电泳后发现四种SSB蛋白均能绑定HCV RNA.结论 我们表达和纯化了四种SSB蛋白,并首次发现SSB蛋白绑定HCV RNA,为未来研究SSB蛋白在RNA上的应用提供一个重要基础.

关键词：DNA、表达的序列标记、肝炎、丙型、RNA

所属期刊栏目：27

分类号：Q786;R392;Q558

在线出版日期：2013-11-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：354-356