人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核核表达系统的构建及单克隆抗体的制备

摘要：

目的 制备针对人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ (TIMP-Ⅰ)融合蛋白的单克隆抗体.方法 用逆转录聚合酶链反应法从纤维化的肝组织中扩增TIMP-Ⅰ编码序列,产物克隆入pQE31载体,转化大肠埃希菌BL21,诱导表达后通过6×His标签进行纯化,用纯化后的蛋白免疫BALB/c小鼠,采用常规的细胞融合技术制备单克隆抗体,并进行鉴定.结果 成功构建了TIMP-Ⅰ原核表达体系,并获得了重组蛋白.筛选出4株能稳定分泌抗TIMP-Ⅰ的单克隆抗体杂交瘤细胞株,免疫球蛋白类型有3株为IgGl类.Western Blot印迹显示这些单抗能特异结合TIMP-1蛋白.结论 成功构建了人基质金属蛋白酶抑制剂Ⅰ原核表达体系,并获得了单克隆抗体.

关键词：间质胶原酶、克隆、分子、抗体、单克隆

所属期刊栏目：27

分类号：S852.659.6;Q784;R392.11

资助基金：解放军第三○二医院重点课题YNKT2011010

在线出版日期：2013-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：231-233