10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2012.05.019
B型流感病毒Yamagata系和Victoria系双重荧光PCR诊断方法的建立与应用
目的 建立一种新型的双重荧光PCR诊断方法,用于B型流感病毒By (B/Yamagata)和Bv(B/Victoria)亚系的准确分子分型.方法 从GenBank随机下载By和By HA(hemagglutinin)基因各50条序列,通过MEGA分析,利用Primer Primer软件设计亚系特异性引物和通用探针,建立双重荧光PCR诊断方法.用HAI(hemagglutination inhibition)实验确认的B型流感病毒亚系分离毒株和A型流感病毒进行特异性验证,用体外转录核酸拷贝数进行灵敏度实验.结果 2006-2010流感监测年份,对17 765份流感样病例咽拭标本中分离到B型流感病毒793株,本方法鉴定有152株By和641株Bv病毒,与HAI鉴定结果一致.本诊断方法的检测特异性达100%,灵敏度达102拷贝/μl,重复性变异系数<3.5%.结论 本研究所建立的荧光PCR方法为流感实时监测提供了有力的技术支撑,适合于流感监测实验室对流感病毒的快速分子诊断.
流感病毒、B型、聚合酶链反应、荧光抗体技术
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R373.1+3;R511.7;R183.3
深圳市科技计划重点项目;深圳市科技计划
2013-01-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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