朊蛋白突变体D178N在RT-QuIC实验中的转化研究

摘要：

目的 利用RT-QuIC研究带有D178N突变的朊蛋白的自我转化能力.方法 以带有人PRNP基因的质粒为模板,通过定点突变,构建了带有D178N突变的人PRNP基因,利用原核表达系统表达并纯化了带有N端及N端缺失的D178N朊蛋白.分别将此蛋白作为底物,利用RT-QuIC体外纤维形成实时监测系统,对各种突变蛋白体外纤维形成进行了观察和比较,并对形成纤维蛋白的蛋白酶抗性进行了初步分析和比较.结果 正确构建了D178N突变的PRNP基因;在RT-QuIC的反应条件下,缺失N端的带有D178N突变的人朊蛋白,即使在不存在prpSc种子的情况下,在体外也能够发生自我转化,且形成的纤维具有蛋白酶抗性;而带有N端的D178N突变的朊蛋白,在RT-QuIC的反应条件下不发生自我转化.结论 朊蛋白N端对D178N突变的朊蛋白自发纤维形成具有一定影响,这为探索和研究遗传型克雅病的致病机制提供了重要线索.

关键词：朊病毒、克雅综合征、核酸扩增技术

所属期刊栏目：26

分类号：S511;Q943.2;Q786

资助基金：国家自然科学基金;国家自然科学基金

在线出版日期：2013-01-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：370-373