构建甲型流感病毒核蛋白融合基因三种方法的比较研究

摘要：

目的 比较构建甲型流感病毒核蛋白NP融合基因的三种方法,以获取成功构建含绿色荧光蛋白融合基因的方法.方法 PCR扩增甲型流感病毒核蛋白NP基因片段,运用三种不同的方法构建NP表达绿色荧光蛋白的融合基因:①含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段与pEGFPN1克隆构建融合基因;②NP基因片段与pMD19-T Vector连接、TA克隆后获得限制性内切酶酶切位点,经pEGFP-N1克隆构建融合基因;③含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段与pMD19-T Simple Vector连接、TA克隆后经pEGFP-N1克隆构建融合基因.结果 含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段TA克隆后经pEGFP-N1克隆,获得高效且稳定的绿色荧光核蛋白融合基因,第一、第二两种方法构建绿色荧光核蛋白融合基因成功率低.结论 含限制性内切酶酶切位点的NP基因片段经TA克隆与pEGFP-N1连接克隆,成功构建了绿色荧光蛋白的甲型流感病毒核蛋白NP融合基因pEGFPN1-NP,该方法高效且重复性好.该研究为进一步了解NP蛋白的生物功能及甲型流感病毒的致病机理奠定了基础.

关键词：流感病毒A型、核蛋白质类、绿色荧光蛋白、基因

所属期刊栏目：26

分类号：R373(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

在线出版日期：2012-06-28（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：70-74