人冠状病毒HKU1血清学检测方法的建立及其初步应用

摘要：

目的 表达HCoV-HKU1的壳蛋白(N蛋白)及棘突蛋白(S蛋白),建立检测血清中相应抗体的方法.方法 使用原核表达系统表达纯化HCoV-HKU1的N蛋白,转膜制条建立基于蛋白印迹的N抗体检测方法.构建HCoV-HKU1 S蛋白的真核表达质粒,转染细胞后,用间接免疫荧光(IFA)建立S抗体检测方法.利用已建立的N抗体和S抗体检测方法,检测了100份正常成人血清.结果 经Western Blot检测,S和N蛋白表达正确;利用已建立的血清学检测方法分析100份正常成人血清,其中HCoV-HKU1 S抗体的阳性率为47%,N抗体的阳性率为48哂,S抗体和N抗体均阳性的占总数的21%,双抗体均阴性的占总数的22%.S抗体和N抗体共同检测可获得74%的阳性检出率.结论 所建立的方法可用于HCoV-HKU1血清学分析,共同检测HCoV-HKU1 S抗体和N抗体可获得较好的检测结果.在正常成年中HCoV-HKU1抗体阳性检出率较高.

关键词：冠状病毒属、病毒蛋白质类、抗体、病毒、血清学

所属期刊栏目：24

分类号：R3(基础医学)

资助基金：863课题2007AA02Z464;2007AA02Z463;十一五重大专项2008ZX10004-014

在线出版日期：2010-11-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：376-379