呼吸道合胞病毒分泌型融合蛋白的真核表达和纯化

摘要：

目的 研究人呼吸道合胞病毒(human respiratory syneytial viruse,RSV)分泌型融合蛋白(secreted fusion protein,sF)基因在杆状病毒中的表达及纯化.方法 根据编码F蛋白的基因序列设计引物,以PCR方法将F蛋白基因的跨膜区和胞质区核酸序列替换为6×His核酸序列.获得COOH'端带有His标签的重组sF-His蛋白编码基因,利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统,构建可表达sF蛋白的重组杆状病毒,用脂质体Cellfectine reagent转染sf9细胞,实现sF在sf9细胞中的表达,Ni柱亲和层析纯化sF蛋白.结果 成功获得了sF-His编码基因,构建的重组杆状病毒可高效表达sF,Ni-柱纯化后sF的浓度为1.084 mg/ml,纯度达90%以上.结论 杆状病毒系统是制备8F的有效方法,纯化的sF蛋白为RSV新型疫苗及单克隆抗体和诊断试剂等研究奠定了基础.

关键词：杆状病毒科、呼吸道合胞病毒、人、糖蛋白类

所属期刊栏目：23

分类号：R392;S852.65;Q78

资助基金：国家自然科学基金;教育部留学回国人员科研启动基金;北京交通大学科技项目

在线出版日期：2009-12-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：337-339