实时荧光逆转录聚合酶链反应检测人类偏肺病毒方法的建立与应用

摘要：

目的 建立一种快速、准确、特异的实时荧光逆转录聚合酶链反应方法(PCR),以检测人类偏肺病毒.方法 根据Hmpv-L基因序列设计引物和探针并对实时荧光PCR反应体系进行优化,提取总RNA,通过随机引物进行反转录反应;产生的cDNA通过实时荧光PCR进行鉴定.进一步评价实时荧光反转录PCR方法的特异性、灵敏度、重复性,对180例临床样本进行检测.结果 本实验所建立的实时荧光反转录PCR方法可准确、特异地检测人类偏肺病毒;该方法的灵敏度可达到1拷贝/μl;检测的批间和批内的变异系数均小于5%.180例肺炎和支气管炎患儿痰标本中共检测出28例人类偏肺病毒阳性,阳性率为15.56%(28/180);肺炎患儿检出率为15.60%(17/109);支气管炎患儿检出率为15.49%(11/71).男性患儿检出率18.56%(18/97),女性患儿检出率12.05%(10/83).患儿年龄小于2岁者检出率22.34%(21/94),2～5岁者检出率8.70%(6/69),大于5岁者检出率5.88%(1/17).结论 本研究建立的人类偏肺病毒实时荧光逆转录PCR方法快速、准确,结果可靠,实用性强;人类偏肺病毒已成为小儿呼吸道感染的重要病原体之一.

关键词：逆转录聚合酶链反应、变性肺病毒

所属期刊栏目：22

分类号：R4(临床医学)

在线出版日期：2009-02-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：510-512