实时荧光定量RT-PCR监测恒河猴体内人/猴免疫缺陷病毒载量在传代过程中的变化

摘要：

目的 为分析中国SHIV/猕猴AIDS模型的病毒载量变化趋势,建立一种实时、灵敏、特异的针对人/猴免疫缺陷病毒的定量检测方法.方法 体外转录制备RNA标准品,利用TaqMan EZRT-PCR试剂盒的反应体系和针对SHIV gag保守区91个碱基的TaqMan探针和引物,建立一步法实时荧光定量RT-PCR.提取126份来自SHIV-CN97001感染恒河猴血浆病毒RNA并定量检测.结果 利用梯度稀释的RNA标准品对反应体系进行优化,标准曲线下限达到2×102 拷贝/ml,相关性(r＞0.99)及重复性(CV=4.14%)均能达到测定要求.病毒载量的检测结果表明SHIV-CN97001在猴体内传代过程中病毒载量有先升后降的趋势,病毒载量通常在接种病毒或感染猴的全血后第14天达到高峰.血浆载量可达到105～106 拷贝/ml.结论 成功地建立了一步法定量SHIV RNA的实时荧光定量RT-PCR,为SHIV/恒河猴AIDS模型的建立与应用提供了灵敏的病毒载量检测方法.SHIV-CN97001的体内繁殖能力在猴体内传代过程中有所增强.

关键词：逆转录聚合酶链反应、SIV、病毒载量

所属期刊栏目：21

分类号：R4(临床医学)

资助基金：CIPRA项目U19AI051915;国家重点基础研究发展计划973计划2005CB522903

在线出版日期：2007-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共3页

页码：174-176