共表达HIV-1 gag-gp120与白细胞介素6重组鸡痘病毒的筛选

摘要：

目的构建共表达中国株HIV-1 gag-gp120与白细胞介素6(IL-6)的重组鸡痘病毒(FPV).方法分别将HIV-1 gag-gp120基因和IL-6基因插入到FPV表达质粒pUTAL复合启动子和单一启动子下游,构建重组FPV表达质粒pUTA-GE-IL6.利用脂质体法将重组质粒和FPV 282E4株共转染鸡胚成纤维细胞,经BUdR加压筛选,重组病毒分别用SDS-PAGE和Western Bolt进行鉴定,观察病毒样粒子的形成和重组病毒在哺乳动物细胞中的表达,并分析其免疫原性.结果阳性重组病毒基因组点膜处有显色斑点,Western Bolt结果显示重组病毒表达了gag-gp120嵌合蛋白和IL-6,在病毒感染细胞中有反转录病毒样粒子形成,且重组病毒可在哺乳动物细胞中表达目的蛋白.小鼠免疫指标检测表明该重组病毒具有很好的免疫原性.结论成功构建了共表达中国株HIV-1 gag-gp120与IL-6的重组FPV,为HIV-1基因工程活载体疫苗和巨分子颗粒化疫苗的制备奠定了基础.

关键词：HIV-1、HIV包膜蛋白质gp120、白细胞介素6、鸡痘病毒

所属期刊栏目：19

分类号：R3(基础医学)

资助基金：国家自然科学基金39825119;国家高技术研究发展计划863计划2001AA215031

在线出版日期：2005-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：267-270