重组人干扰素Epsilon的表达纯化及生物学性质研究

摘要：

目的表达纯化一种新型重组人干扰素Epsilon(rhIFN-ε155ser),并对它的生物学特性进行初步研究.方法人工合成rhIFN-ε155ser的全基因序列,并按照大肠埃希菌密码子嗜性作适当改造,然后构建到原核表达载体pBV220,在大肠埃希菌DH5α中表达.将表达的包涵体蛋白纯化复性后,对最终产物的抗病毒活性、细胞生长抑制活性和NK细胞刺激活性进行鉴定.同时,利用芯片技术,从基因的水平对rhIFN-ε155ser的生物机制进行初步的了解.结果rhIFN-ε155ser以包涵体的形式表达,经纯化蛋白纯度可达95%.复性后rhIFN-ε155ser在WISH抗VSV系统中的抗病毒活性可达6×105IU/mg.在100～1000 pg/ml下rhIFN-ε155ser具有剂量依赖性的抗增殖活性,而NK细胞刺激活性无剂量依赖性.基因芯片扫描发现,22 278个位点中,有283个基因显著上调,另外1894个显著下降.结论成功地表达了rhIFN-ε155ser,发现此IFN具有一定的抗病毒、抗增殖和NK细胞刺激活性.芯片技术可进一步拓展对IFN的功能研究.

关键词：干扰素Ⅰ型、包涵体、蛋白质复性、生物活性、基因芯片

所属期刊栏目：19

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2005-11-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：227-231