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10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2005.02.008

HIV-1中国株CN54 Gag蛋白在毕赤酵母中的表达纯化和鉴定

引用
目的利用毕赤酵母表达系统高效表达HIV-1中国株CN54的Gag蛋白,初步确立发酵和纯化工艺.方法PCR扩增CN54 Gag基因,插入毕赤酵母表达载体pPS1.0,电转化毕赤酵母菌株GS115,G418筛选高表达工程菌,利用5L发酵罐进行高密发酵,通过SP Sepharose FF和DEAE Separose FF柱层析,用HIV-1阳性血清和p24抗原检测试剂盒对纯化后的Gag蛋白进行免疫学性质的鉴定.结果构建了高效表达CN54 Gag蛋白的毕赤酵母工程菌株,发酵罐培养的菌体密度吸光度(A600值)超过300,Gag蛋白表达量达到120 mg/L.纯化后的Gag蛋白纯度高于90%,p24检测强阳性并能够与HIV-1阳性血清发生特异的抗原抗体结合反应.结论本研究在毕赤酵母中高效表达了HIV-1中国株CN54的Gag蛋白,并进行了纯化和鉴定,为针对我国新一代HIV蛋白亚单位疫苗的研制奠定了基础.

HIV-1、HIV核心蛋白质P55、基因表达、毕赤酵母

19

R3(基础医学)

国家高技术研究发展计划863计划2001AA215031;科技部国际合作重点项目

2005-07-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共4页

128-131

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中华实验和临床病毒学杂志

1003-9279

11-2866/R

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2005,19(2)

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