抗汉坦病毒糖蛋白细胞内抗体的构建和稳定表达

摘要：

目的在内质网和细胞质内表达抗汉坦病毒糖蛋白G1,G2细胞内抗体. 方法 PCR分别扩增抗汉坦病毒糖蛋白抗体VH和VL段基因,克隆入单链抗体表达载体pOPE-101-215(Yol),转化大肠埃希菌XLI-Blue,IPTG诱导表达并鉴定其活性,再将单链抗体基因克隆入真核表达载体pEF/myc/ER和pEF/myc/CYTO,转染Vero E6,使单链抗体在内质网和细胞质内得到表达;通过G418和有限稀释法筛选阳性克隆,建立稳定表达抗汉坦病毒糖蛋白细胞内抗体的细胞系.结果 Western-blot检测证实原核表达单链抗体,ELISA,IFA检测其具有抗原结合活性,真核表达显示内质网和细胞质内特异性荧光,筛选细胞系阳性率>95%.结论成功建立稳定表达抗汉坦病毒糖蛋白细胞内抗体的细胞系,为利用汉坦病毒细胞内抗体研究抗病毒作用和病毒的包装复制及病毒感染机制奠定良好基础.

关键词：汉坦病毒、糖蛋白、抗体、单链、表达

所属期刊栏目：17

分类号：R37(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金C03011402

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：116-120