在翻译水平上提高人干扰素α1基因的原核表达

摘要：

目的根据翻译起始调控的定量理论及利用翻译增强子序列,提高人干扰素α1型变种IFN-α1C基因的原核表达.方法采用"步移式"聚合酶链反应(PCR), 对IFN-α1C基因5′端核苷酸序列进行三种不同程度的碱基突变, 使IFN-α1C在 pBV220载体中形成的翻译起始区域(TIR)的二级结构自由能(△G)逐渐降低,同时,采用PCR技术,将翻译增强子cDNA序列引入pBV220中的SD序列上游,构建一种新型载体pBVE.结果三种IFN-α1C改造基因的表达量均有所提高,而且随△G从原有的-50 241.6 J/mol降至-22 190.0 J/mol (绝对值,下同),其表达量有逐渐升高趋势, 最高可达2.43×108 U/L,约为IFN-α1C母体的13倍.选用IFN-α1C及其三种改造基因为报导基因,结果显示以pBVE为载体的抗病毒活性比在pBV220中增强了2～5倍.结论含有翻译增强子的pBVE为一种新型原核高效表达载体.翻译调控的定量关系理论,可有效地运用于提高IFN-α1C基因在大肠埃希菌中的表达.

关键词：干扰素α、基因表达、RNA、信使、翻译、遗传、聚合酶链反应

所属期刊栏目：16

分类号：R3(基础医学)

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：315-318