10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2001.02.023
流感病毒中和性基因工程Fab抗体的研制
目的获得基因工程抗流感病毒抗体,为检测其粘膜用药在动物模型中的抗病毒效果奠定基础。方法 从酶联免疫吸附试验阳性的人外周血中分离淋巴细胞,提取总RNA,Oligo\|Dt逆转录Cdna,聚合酶链反应扩增人IgG轻、重链基因,利用pComb3载体构建噬菌体抗体库。用纯化的流感病毒A/Sydeny/5/97(H3N2)为固相抗原筛选抗体Fab段,并在大肠埃希菌中进行分泌性表达。通过血凝抑制实验、免疫荧光实验和病毒中和实验选择具有中和作用的Fab抗体。结果 分离到两株Fab克隆,IV-2和IV-6,流感病毒抗原和抗Fab抗体直接ELISA检测阳性,间接免疫荧光实验呈阳性。它们都具有血凝抑制作用,病毒中和实验显示能使病毒滴度下降30倍和20倍。结论 获得了两株具有病毒中和活性的人源抗流感病毒悉尼株的Fab段抗体,为进一步的表达纯化及粘膜给药研究其抗病毒效果提供材料。
正粘病毒科、免疫球蛋白类、Fab、抗体、单克隆、重组蛋白质类
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R37(医学微生物学(病原细菌学、病原微生物学))
2004-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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