应用双重聚合酶链反应检测乙型、丙型肝炎病毒

摘要：

@@常规聚合酶链反应(PCR)方法对患者HBV和HCV需要分别检测，因而操作繁琐，费时费力，且增加了污染的机会，为此，我们建立了双重PCR技术，实现一步法同时进行HBV和HCV的检测。
选取肝病患者血清标本115例，20例正常对照标本采自HBsAg阴性、肝功能正常的献血员。核酸提取采用蛋白酶K消化，酚／氯仿抽提，乙醇沉淀，将提取的DNA和RNA复悬于焦碳二乙酯处理过的蒸馏水中，并加入2U RNA酶抑制剂Rnasin。PCR反应在核酸提取管中进行，总体积50μl，反应条件为10 mmol／L Tris·Cl(pH8.3)，50mmol／LKCl，2mmol／LMgCl2，0.5μmol／L HBV和HCV引物，0.2 mmol／LdNITP,AMVRT逆转录酶2U，Tag DNA聚合酶2U，RNA酶抑制剂Rnasin 10 U，混匀。

机标关键词：应用、聚合酶链反应检测、乙型、酶抑制剂、核酸提取、乙醇沉淀、血清标本、逆转录酶、肝病患者、反应条件、蒸馏水、一步法、献血员、肝功能、二乙酯、蛋白酶、引物、阴性、选取、污染

所属期刊栏目：14

分类号：R511(传染病)

在线出版日期：2004-03-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共1页

页码：270