10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2000.03.022
一株HIV1变异株的发现
@@我们在进行序列分析过程中发现一株不同于以往国内外报道的新型HIV1的变异毒株。现报道如下:1 材料和方法1.1 前病毒DNA的提取某HIV1感染者300μLEDTA抗凝血,使用Promega公司的DNA提取试剂盒(Wizard GenomicDNA Purification Kit)提取HIV1前病毒DNA。1.2 HIV env基因c2-v3区的套式PCR扩增 以所提的HW1前病毒DNA为模板,利用一对外侧引物EP1,EP2(序列为,EP1:5'-GGCAGTCTAGCA-GAAGAAGAGG-3':EP2:5'-CCTACTTC-C TGCCACATG-3')和一对内侧引物EP3,EP4(序列为,EP3:5'-GATCTGA-CAATTTCACGAACAAT TGC-3';EP4:5'-C TGGGTCCCCTCCTGAAGGATG-3')进行nested-PCR反应。反应条件为94qC30s,55℃30s,72℃30s,35个循环;72℃C5min结束扩增。1.3 PCR扩增片段的克隆P CR扩增的特异性片段经Promega公司的PCR产物纯化试剂盒(WizardPCRprepsDNA pu-rification system)纯化后,与PGEM-T载
体连接克隆于JM109宿主菌中
扩增片段、提取、试剂盒、病毒、现报道如下、特异性片段、材料和方法、引物、序列分析、克隆、反应条件、产物纯化、变异毒株、宿主菌、抗凝血、感染者、循环、套式、模板、连接
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R3(基础医学)
山东省优秀中青年科学家科研奖励基金97314432
2004-03-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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