10.3760/cma.j.cn501225-20230223-00056
红色诺卡菌细胞壁骨架对人中性粒细胞生物学功能的调节作用
目的:探讨红色诺卡菌细胞壁骨架（Nr-CWS）对人中性粒细胞生物学功能的调节作用及其机制。方法:采用实验研究方法。2022年5―10月招募于苏州市体检中心体检的成年健康志愿者15名（男7名、女8名，年龄24~45岁），采集外周静脉血，采用免疫磁珠分选法提取中性粒细胞。将细胞分为不进行任何处理的正常对照组、仅用终质量浓度为60 ng/mL Nr-CWS处理的单纯Nr-CWS组、仅用终质量浓度1 μg/mL内毒素/脂多糖（LPS）刺激的单纯LPS组、用同前LPS刺激后再用Nr-CWS处理的LPS+Nr-CWS组。培养1 h，采用改良后的琼脂糖趋化模型检测中性粒细胞的趋化距离、趋化细胞百分比、趋化指数、最大趋化速度、趋化功能评分；采用流式细胞术检测发生吞噬的细胞占比与荧光强度，活性氧水平，颗粒蛋白CD35、CD66b、CD63的蛋白表达水平，以及细胞培养上清液中炎症因子白细胞介素2（IL-2）、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、γ干扰素浓度。以上实验各组样本数均为15。对数据行析因设计方差分析与独立样本
t检验。
结果:培养1 h，正常对照组、单纯Nr-CWS组、单纯LPS组、LPS+Nr-CWS组细胞趋化功能评分分别为15.0、（14.5±0.5）、（1.5±0.5）、（12.0±1.5）分；与正常对照组比较，单纯LPS组与LPS+Nr-CWS组细胞趋化距离、趋化细胞百分比、趋化指数、最大趋化速度与趋化功能评分均显著降低（
t值分别为18.36、18.88、54.28、18.36、46.77，10.58、14.74、6.84、10.58、4.24，
P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞上述5项趋化功能指标均显著升高（
t值分别为11.47、14.65、11.62、11.47、13.75，
P<0.05）。培养1 h，与正常对照组比较，单纯Nr-CWS组发生吞噬的细胞占比与荧光强度均显著升高（
t值分别为6.86、6.73，
P<0.05），单纯LPS组（
t值分别为7.35、22.72，
P<0.05）与LPS+Nr-CWS组（
t值分别为21.37、13.10，
P<0.05）发生吞噬的细胞占比与荧光强度均明显降低。培养1 h，与正常对照组比较，单纯LPS组细胞活性氧水平显著升高（
t=6.64，
P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞活性氧水平明显降低（
t=5.46，
P<0.05）。培养1 h，与正常对照组比较，单纯LPS组与LPS+Nr-CWS组细胞CD35、CD66b、CD63蛋白表达均显著升高（
t值分别为16.75、17.45、10.82，5.70、19.35、15.37，
P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞CD35、CD66b、CD63蛋白表达均明显下降（
t值分别为4.92、5.72、3.18，
P<0.05）。培养1 h，与正常对照组比较，单纯LPS组细胞培养上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、γ干扰素浓度均显著升高（
t值分别为22.10、9.50、7.21、10.22、24.88、8.43、47.48，
P<0.05），LPS+Nr-CWS组细胞培养上清液中IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、γ干扰素浓度均显著上升（
t值分别为4.68、5.12、8.02、5.58、7.13，
P<0.05）；与单纯LPS组比较，LPS+Nr-CWS组细胞培养上清液中IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A、TNF-α、γ干扰素浓度均显著降低（
t值分别为5.39、2.83、5.79、2.90、5.87、4.88、39.64，
P<0.05）。
结论:Nr-CWS能够提高正常状态下人中性粒细胞的吞噬能力，改善感染状态下人中性粒细胞的趋化功能及活性氧、脱颗粒蛋白、炎症因子水平，在先天免疫层面通过调控人中性粒细胞生物学行为，提高抗感染能力。
感染、吞噬作用、趋化作用、中性粒细胞、生物学功能、红色诺卡菌细胞壁骨架
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国家自然科学基金联合基金重点项目U21A20370;国家自然科学基金面上项目82072217，81772135;江苏省自然科学基金项目BK20201178;Key Program of Joint Fund of National Natural Science Foundation of ChinaU21A20370;General Program of National Natural Science Foundation of China82072217, 81772135;Natural Science Foundation of Jiangsu Province of ChinaBK20201178
2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
共8页
625-632
