高乌甲素对重度烧伤大鼠疼痛和炎症反应的作用及其机制

摘要：

目的 探讨高乌甲素(LA)对重度烧伤大鼠疼痛和炎症反应的作用及其机制. 方法 取40只SD大鼠按随机数字表法(下同)分为健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组、单纯烧伤组、烧伤+ LA组、健康+LA组,每组8只.单纯烧伤组、烧伤+LA组大鼠背部及右后肢造成约32％ TBSA深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤),假伤+生理盐水组大鼠致假伤.烧伤+ LA组大鼠于伤前2.0h及伤后即刻与伤后24.0、48.0、72.0 h分别腹腔注射1 g/L LA溶液4 mL/kg,健康+LA组大鼠于同前各时相点腹腔注射相同剂量的LA溶液,健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组大鼠于同前各时相点腹腔注射生理盐水4 mL/kg.于伤前1.5h及伤后12.5、24.5、36.5、48.5、72.5 h,观察致伤大鼠疼痛行为并对大鼠行机械缩足反射阈值(PWMT)检测;未致伤2组大鼠于同前各时相点行相同观测.另取32只SD大鼠分为生理盐水组、三硝基苯基(TNP)-ATP组、米诺环素组、磷酸吡哆醛(PPADS)组,每组8只,均同前致烧伤.伤后48.0 h,生理盐水组大鼠鞘内注入10 μL生理盐水,TNP-ATP组大鼠鞘内注入30 nmol/μL TNP-ATP 10 μL,米诺环素组大鼠鞘内注入5 g/L米诺环素10μL,PPADS组大鼠鞘内注入10 nmol/μL PPADS 10 μL.注射前后0.5h,测量大鼠PWMT.伤后72.5 h,取假伤+生理盐水组、单纯烧伤组、烧伤+ LA组大鼠脊髓背角组织行免疫荧光染色观察P2X4受体和OX42受体共表达情况,行免疫组织化学染色观察P2X4受体表达并计数阳性细胞;取大鼠静脉血采用ELISA法检测血清TNF-α、IL-1 β含量.未致伤2组大鼠于同前时相点行相同观测.对数据行单因素方差分析、重复测量方差分析、SNK检验、配对t检验和Bonferroni校正. 结果 (1)健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组、健康+LA组大鼠各时相点未出现活动异常现象.至伤后72.5 h,单纯烧伤组大鼠精神状态欠佳,可见背部及右后肢烧伤皮肤红肿、有水疱,出现步态不稳等现象,偶有舔咬、抓挠现象;烧伤+LA组大鼠舔咬、跛行等行为较单纯烧伤组减少,创面红肿消退较单纯烧伤组快.(2)伤前1.5h,健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组、单纯烧伤组、烧伤+ LA组、健康+LA组大鼠PWMT组间总体比较差异无统计学意义(F =0.106,P＞0.05).单纯烧伤组大鼠伤后各时相点PWMT均明显低于其余4组(P值均小于0.05),烧伤+LA组大鼠伤后各时相点PWMT均明显低于健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组和健康+ LA组(P值均小于0.05).(3)注射前0.5h,生理盐水组、TNP-ATP组、PPADS组、米诺环素组大鼠PWMT相近,分别为15.3±0.8、15.1±1.0、15.3±0.9、15.6±1.1(F=0.343,P＞0.05).注射后0.5h,生理盐水组和PPADS组大鼠PWMT分别为15.2±1.2和14.8±1.0,明显低于TNP-ATP组和米诺环素组的20.8±1.4和26.3±1.0(P值均小于0.05).生理盐水组和PPADS组大鼠注射前后PWMT相近(t值分别为0.073和-0.772,P值均大于0.05),TNP-ATP组和米诺环素组大鼠注射后PWMT较注射前升高(t值分别为-10.180和-20.813,P值均小于0.01).(4)伤后72.5 h,健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组、健康+LA组大鼠少量小胶质细胞共表达P2X4受体和0X42受体,单纯烧伤组及烧伤+LA组大鼠大量小胶质细胞出现P2X4受体和OX42受体共表达.伤后72.5 h,单纯烧伤组大鼠P2X4受体阳性细胞数较其余4组多(P值均小于0.05),烧伤+LA组大鼠P2X4受体阳性细胞数明显多于健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组和健康+ LA组(P值均小于0.05).(5)伤后72.5 h,单纯烧伤组大鼠血清TNF-α和IL-1 β含量均明显高于其余4组(P值均小于0.001),烧伤+LA组大鼠血清TNF-α和IL-1β含量均明显低于健康+生理盐水组、假伤+生理盐水组和健康+ LA组(P值均小于0.001). 结论 LA对重度烧伤大鼠具有明显镇痛作用,可改善机体过度炎症状态.其作用机制可能与抑制脊髓背角小胶质细胞上P2X4受体表达,减少炎症因子TNF-α、IL-1β释放有关.

关键词：烧伤、疼痛、受体、嘌呤能P2X4、高乌甲素

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分类号：R3 ;R74

资助基金：贵州省科教青年英才培养工程项目黔省专合字[2012]191号;汇川区科技计划项目.Science and Education Young Talents Development Funds Project of Guizhou Province2012191;Science and Technology Project of Huichuan District

在线出版日期：2017-07-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：374-380