严重低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕成纤维细胞功能的影响

摘要：

目的 模拟增生性瘢痕形成和演变过程中的环境因素,探讨中、重度低氧低血清蛋白对人增生性瘢痕Fb(HSF)功能的影响.方法 常规培养人HSF,取第3～6代细胞按照随机数字表法分为10.0％氧气+10.0％小牛血清(FCS)、5.0％氧气+5.0％ FCS、0.5％氧气+0.5％ FCS组,先用不含FCS的DMEM培养液培养24 h后,再采用相应体积分数的氧气和FCS培养.采用噻唑蓝法检测细胞增殖活性(结果以实际细胞数表示),天狼星红染色法检测细胞总胶原含量(结果以吸光度值表示),蛋白质印迹法检测低氧诱导因子1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、TGF-β1、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、P53的蛋白表达(结果以灰度值比值表示),原位末端标记法检测细胞凋亡率.以上实验每组样本数均为3.对数据行Kruskal-Wallis检验、Dunnett检验.结果 (1)与10.0％氧气+10.0％ FCS组的(11 000±1 306)个比较,5.0％氧气+5.0％ FCS组细胞增殖活性较高”(13 290±1 500)个,P＜0.05”,0.5％氧气+0.5％ FCS组细胞增殖活性较低”(6 999±765)个,P＜0.05”.(2)与10.0％氧气+ 10.0％ FCS组(0.039 6 ±0.004 2)比较,5.0％氧气+5.0％ FCS组细胞总胶原含量较高(0.051 6±0.005 1,P＜0.05),0.5％氧气+0.5％ FCS组细胞总胶原含量较低(0.015 6±0.002 4,P＜0.05).(3)与10.0％氧气+10.0％ FCS组比较,5.0％氧气+5.0％ FCS组细胞的HIF-1α、VEGF、TGF-β1、Bcl-2蛋白表达量增高(P值均小于0.05),P53的蛋白表达量差异不明显(P＞0.05);0.5％氧气+0.5％ FCS组细胞的HIF-1α、VEGF、TGF-β1、Bcl-2蛋白表达量下降(P值均小于0.05),P53蛋白表达量增高(P＜0.05).(4)与10.0％氧气+10.0％ FCS组”(1.2±0.9)％”比较,5.0％氧气+ 5.0％ FCS组细胞凋亡率无明显差异”(2.6±0.9)％,P＞0.05”,0.5％氧气+0.5％ FCS组细胞凋亡率明显升高”(13.3±4.1)％,P ＜0.05”.结论 重度低氧低血清蛋白可抑制人HSF的增殖活性、总胶原生成,并诱导细胞凋亡.

关键词：瘢痕、细胞低氧、成纤维细胞、细胞增殖、细胞凋亡、胶原、低血清

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在线出版日期：2016-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：594-598