自体脂肪源性间充质干细胞局部移植对兔耳增生性瘢痕形成的影响

摘要：

目的 探讨兔自体脂肪源性间充质干细胞(ADSC)局部移植对兔耳增生性瘢痕形成的影响.方法 取6只新西兰大耳白兔腹股沟处脂肪组织,分离ADSC并进行传代培养.取每只兔的第3代ADSC进行以下实验.在每只兔每侧耳腹造成6个直径为6 mm的全层皮肤缺损创面,观察创面上皮化情况及局部组织增生情况,记录创面完全上皮化时间和增生性瘢痕形成时间.选择兔左耳创面为ADSC组,右耳创面为对照组,每组36个创面.于创面完全上皮化后(伤后25 d),ADSC组创面注射0.2 mL溴脱氧尿苷(BrdU)标记的自体ADSC悬液(浓度为5×106个/mL),对照组创面注射等量PBS.每5天注射1次,共注射3次(后2次注射于创面愈合后形成的瘢痕内).于第3次注射后5d分别切取2组增生性瘢痕组织,HE染色观察组织形态,VG染色观察增生性瘢痕中胶原排列情况,荧光显微镜下观察增生性瘢痕中BrdU标记的ADSC分布,ELISA法检测增生性瘢痕中Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1、核心蛋白多糖的蛋白含量,实时荧光定量RT-PCR法检测增生性瘢痕中TGF-β1、核心蛋白多糖的mRNA表达.对数据行配对t检验.结果 (1)兔耳创面完全上皮化时间为伤后(20.0±2.0)d,伤后(35.0±2.2)d增生性瘢痕形成.伤后40 d,对照组增生性瘢痕仍维持较明显的增生状态,ADSC组增生性瘢痕体积缩小、变平、质地变软、色泽稍变浅.(2)与对照组比较,ADSC组增生性瘢痕中上皮细胞层数增多,可见上皮脚样及真皮乳突样结构形成,真皮层有核细胞数量明显增多.对照组增生性瘢痕中胶原紧密,排列较紊乱;ADSC组增生性瘢痕中胶原密度较对照组下降,排列较规整.(3)伤后40 d,ADSC组增生性瘢痕中仍可见BrdU标记的ADSC.(4)ADSC组增生性瘢痕中Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1、核心蛋白多糖蛋白含量分别为(1.40 ±0.04)、(8.18±0.23) μg/L及(25.1±0.7)ng/L、(4.872±0.101) ng/mL,对照组增生性瘢痕中Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1、核心蛋白多糖蛋白含量分别为(2.29±0.05)、(12.20 ±0.38) μg/L及(37.2±1.1)ng/L、(4.143 ±0.024) ng/mL.与对照组比较,ADSC组增生性瘢痕中Ⅰ、Ⅲ型胶原及TGF-β1蛋白含量明显降低(t值为-33.66～-22.84,P值均小于0.001),核心蛋白多糖蛋白含量明显增高(t=10.41,P＜0.001).(5)与对照组比较,ADSC组增生性瘢痕中TGF-β1mRNA表达量明显降低(t=4.45,P＜0.01),核心蛋白多糖的mRNA表达量明显升高(t =5.61,P＜0.01).结论 兔增生性瘢痕形成早期瘢痕内移植自体ADSC可抑制增生性瘢痕的形成,改善创面愈合质量,其机制可能与ADSC下调TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达,上调核心蛋白多糖的表达有关.

关键词：伤口愈合、瘢痕、间质干细胞移植、脂肪源性间充质干细胞

所属期刊栏目：32

分类号：R622+1;R776.1;S813

在线出版日期：2016-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：582-587