表皮葡萄球菌生物膜抑制肽对该菌黏附及生物膜形成的影响

摘要：

目的 研究表皮葡萄球菌生物膜抑制肽(简称抑制肽)对表皮葡萄球菌早期黏附及生物膜形成的影响. 方法 采用多肽合成仪合成抑制肽,其纯度为96.8％、相对分子质量为874.4.(1)采用终浓度为1～256 μg/mL的抑制肽培养表皮葡萄球菌ATCC 35984(下同)菌液,不含菌液的M-H肉汤为空白对照,观察抑制肽对该菌的MIC(样本数为3).(2)采用含终浓度为16、32、64、128、256 μg/mL抑制肽的胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)培养液培养表皮葡萄球菌菌液(设为相应浓度抑制肽组),以TSB培养基培养前述菌液作为阴性对照组,从培养即刻起每小时观察该菌的生长情况(结果以吸光度值表示),绘制该菌培养24 h内的生长曲线(每组各时相点样本数为3).(3)采用含终浓度为16、32、64、128、256 μg/mL抑制肽的TSB培养液培养表皮葡萄球菌菌液(设为相应浓度抑制肽组),以TSB培养基培养前述菌液作为阴性对照组,培养4h检测该菌黏附情况,培养20 h检测该菌生物膜的形成情况(结果均以吸光度值表示,样本数均为10).(4)采用含128 μg/mL抑制肽的TSB培养液培养表皮葡萄球菌菌液(设为128μg/mL抑制肽组),以TSB培养基培养前述菌液作为阴性对照组,培养24 h后采用激光扫描共聚焦显微镜观察该菌的黏附与生物膜形成情况(样本数为3).对数据行单因素方差分析、LSD检验、Dunnett T3检验. 结果 (1)抑制肽对表皮葡萄球菌的MIC大于256 μg/mL. (2)与阴性对照组比较,各浓度抑制肽组表皮葡萄球菌培养24 h内的生长曲线无明显变化.(3)256、128、64、32 μg/mL抑制肽组培养4h表皮葡萄球菌的黏附情况分别为0.20 ±0.04、0.27 ±0.03、0.35±0.04、0.40 ±0.04,明显少于阴性对照组(0.53±0.10,P＜0.05或P＜0.01);16 μg/mL抑制肽组培养4 h该菌的黏附情况(0.47±0.09)与阴性对照组相近(P＞0.05).256、128、64 μg/mL抑制肽组培养20 h的表皮葡萄球菌生物膜形成情况分别为0.49 ±0.10、0.68 ±0.06、0.93 ±0.13,明显少于阴性对照组(1.21 ±0.18,P＜0.05或P＜0.01);32、16 μg/mL抑制肽组培养20 h该菌生物膜形成情况分别为1.18 ±0.22、1.15 ±0.26,与阴性对照组相近(P值均大于0.05).(4)激光扫描共聚焦显微镜显示,培养24 h后阴性对照组黏附的表皮葡萄球菌较多,形成的生物膜结构致密;128 μg/mL抑制肽组黏附的表皮葡萄球菌较少,形成的生物膜结构较为疏松. 结论 抑制肽能显著抑制表皮葡萄球菌早期黏附及生物膜形成,但其结构需要进一步修饰.

关键词：葡萄球菌,表皮、生物膜、抑制肽

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资助基金：重庆市应用开发计划cstc2013yykfA10012

在线出版日期：2015-09-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：285-289