对GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪皮进行异种移植的效果观察

摘要：

目的:评估采用GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪皮进行猪－猴移植的效果。方法:供体猪断层皮肤分别取自双基因敲除近交系五指山小型猪、野生型五指山近交系小型猪，受体为恒河猴，按移植皮片不同分为实验组、对照组，每组4只。于每只恒河猴背部制成4个全层皮肤切除创面，分别移植双敲基因猪皮、野生型猪皮。术后不同时间点观察移植皮片的颜色、质地等，评估皮片活力，并取标本进行病理检查；不同时间点留取血清检测IL-2、IL-4、IL-12、IFN-γ含量与IFN-γ/IL-4。结果:双敲基因猪皮片的平均存活时间为(13.9±3.1)d，长于野生型猪皮的(11.0±2.0)d(t＝－3.0901，P＝0.0043)。术后早期两组皮片均成活良好；术后第7天，双敲基因猪皮外观仍红润，部分野生型猪皮可见皮下大水疱或小水疱或紫绀等排异表现；术后第10天，双敲基因猪皮片的质地较野生型猪皮柔软，野生型猪皮于之前发现的紫绀表现仍存在；术后第12天，部分双敲基因猪皮片质地仍完整、柔软，野生型猪皮无完整红润的皮片存在；术后第14天，双敲基因猪皮与野生型猪皮分别有9块、14块皮片完全脱落，双敲基因猪皮脱落率低于野生猪皮(Pearson chi2＝3.8647，P＝0.049)，仍存在于创面的7个双敲基因猪皮中的2块保持温暖、柔软，至术后第21天干燥、失活。病理观察显示两种皮肤移植后早期无明显差别；术后第7天，双敲基因猪皮和野生型猪皮表皮层细胞数量减少，真皮胶原组织水肿，野生型猪皮表皮层内出现小空泡；部分双敲基因猪皮和野生型猪皮与基底床紧密相连，形成嫁接；术后第10天，两种猪皮表皮细胞数量较前继续减少，表皮层均可见空泡，其中双敲基因猪皮表皮层出现的空泡与野生型猪皮在术后第7天的表现类似，而野生型猪皮表皮层的空泡较前明显增多增大，两种皮肤与基底床仍紧密连接；术后第14天，部分双敲基因猪皮整体结构仍基本保持完整，但表皮层空泡明显扩大，使得表皮层与真皮层大部分分离，真皮与基底仍形成连接；野生型猪皮脱落后基底床暴露，基底肉芽组织增生，大量炎细胞浸润。两组血清IL-2、IL-4、IL-12、IFN-γ水平与IFN-γ/IL-4比值比较未见规律性改变。结论:GGTA1/β4GalNT2双基因敲除近交系五指山小型猪皮免疫排异性减轻，存活时间延长，有应用于临床治疗烧伤创面的前景。

关键词：异种移植、皮肤移植、烧伤

所属期刊栏目：18

资助基金：国家重点研发计划2017YFD0501606

在线出版日期：2023-07-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：241-248