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10.3877/cma.j.issn.1673-9450.2019.03.005

乳糜化脂肪对移植于裸鼠背部皮下的人增生性瘢痕影响的实验研究

引用
目的 评价乳糜化脂肪对移植于裸鼠背部皮下人增生性瘢痕的影响.方法 选取18只BALB/c裸鼠;收集解放军总医院第四医学中心烧伤整形科行腹部、大腿外侧部脂肪负压抽吸手术获取的脂肪颗粒细胞及面、颈部手术切除的增生性瘢痕组织;脂肪颗粒细胞经过纳米转换头等操作处理为乳糜化脂肪;无菌条件下将增生性瘢痕组织切割成多块小样本;用眼科剪于各个裸鼠背部各作4个皮肤切口,稍做游离后将前述人增生性瘢痕组织块埋植入切口内,制备增生性瘢痕裸鼠动物模型.18只裸鼠按照随机数字表法分为3组,对照组,曲安奈德组和乳糜化脂肪组,每组6只裸鼠,24块瘢痕组织.移植后1周,对照组于每块移植瘢痕组织块内注射0.9%氯化钠溶液(0.05 mL/g);曲安奈德组注射曲安奈德注射液(0.05 mL/g);乳糜化脂肪组注射乳糜化脂肪(0.05 mL/g);之后每周各注射1次.移植后4周取材,比较移植前人增生性瘢痕组织块重量、移植后4周人增生性瘢痕组织块重量变化百分比;行苏木精-伊红染色和Masson染色,生物显微镜下观察组织形态学变化;比较Masson染色半定量分析阳性面积(天蓝色)占整体视野总面积的百分比.行免疫组织化学染色检测核心蛋白聚糖表达.对数据行单因素方差分析和Dunnett-t检验.结果 移植前,3组人增生性瘢痕组织块重量比较,差异无统计学意义(F=26.230,P=0.119),移植后4周,乳糜化脂肪组、曲安奈德组、对照组人增生性瘢痕组织块重量变化百分比分别为(73.2±15.9)%、(79.5±8.6)%、(87.0±14.9)%,比较差异有统计学意义(F=16.680,P=0.042),乳糜化脂肪组分别与对照组、曲安奈德组比较,差异均有统计学意义(t=14.130、1.228,P=0.010、0.099).组织学观察可见,苏木精-伊红染色与Masson染色整体变化趋势相符:对照组真皮层可见大量胶原纤维及纤维细胞,胶原纤维排列紊乱;曲安奈德组真皮层见粗大胶原纤维,连续性及整齐度可;乳糜化脂肪组真皮层胶原纤维数量少且排列规律.Masson染色半定量分析:乳糜化脂肪组、曲安奈德组、对照组阳性面积(天蓝色)占整体视野总面积的百分比分别为(74.3±13.5)%、(80.9±9.0)%、(91.2±4.5)%,3组比较差异有统计学意义(F=1.708,P=0.025),乳糜化脂肪组分别与曲安奈德组、对照组比较,差异均有统计学意义(t=13.130、7.806,P=0.027、0.019).增生性瘢痕中核心蛋白聚糖免疫组织化学分析结果:光学显微镜下可见曲安奈德组、乳糜化脂肪组显示出核心蛋白聚糖阳性染色结果,且乳糜化脂肪组染色强于曲安奈德组.对照组极其低地表达点、斑片状核心蛋白聚糖染色.乳糜化脂肪组、曲安奈德组、对照组核心蛋白聚糖表达量分别为0.021 ±0.010、0.025 ±0.012、0.088 ±0.058,3组比较差异有统计学意义(F =32.160,P=0.034),乳糜化脂肪组分别与曲安奈德组、对照组比较,差异均有统计学意义(t=8.016、1.224,P=0.048,0.027).结论 乳糜化脂肪注射至人增生性瘢痕可降低成纤维细胞密度和数量,促进胶原排列、数量及形状正常化,改善胶原堆积等组织学特征.

乳糜、脂肪组织、瘢痕、增生、小鼠、成纤维细胞、胶原

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国家自然科学基金项目81772085

2019-07-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

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