脂多糖诱导对内皮细胞释放内皮细胞微粒的影响

摘要：

目的 探讨脂多糖刺激对内皮细胞释放内皮细胞微粒(EMP)的影响.方法 取人脐静脉内皮细胞培养,分为正常对照组(无脂多糖诱导)和不同浓度脂多糖(浓度分别为0.1、1.0、10.0、20.0 μg/mL)组,脂多糖诱导24 h后收集细胞培养液并消化内皮细胞制成细胞悬液.离心法提取细胞培养液内的EMP,加入特异性荧光抗体(anti-CD31-CFS、anti-CD51-PE、anti-CD54-FITC、anti-CD144-PE、anti-CD62E-APC).采用流式细胞仪检测脂多糖诱导内皮细胞释放荧光标记EMP的变化以及内皮细胞的凋亡率.对数据行方差分析、￡检验、Dunnett-t检验.结果 对照组和0.1、1.0、10.0、20.0 μg/mL脂多糖组CD31+EMP数量水平分别为(1.23 ±0.43)×106、(1.92 ±0.64)×106、(2.55 ±0.78)×106、(3.96±0.78)×106、(6.96±1.80)×106,组间比较差异有统计学意义(F=5.83,P＜0.05),CD31+ EMP占总体EMP的比值分别为(4.57±1.33)％、(5.92±1.24)％、(6.93±1.61)％、(7.44±1.09)％、(13.44±3.39)％,组间比较差异有统计学意义(F=3.43,P＜0.05).与对照组比较,10.0、20.0 μg/mL脂多糖组CD31+ EMP数量水平明显升高,差异均有统计学意义(t=-3.06、-3.61,P值均小于0.05);20.0 μg/mL脂多糖组CD31+ EMP数量水平高于0.1、1.0 μg/mL脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05).CD31+ EMP占总体EMP的比值20.0 μg/mL脂多糖组高于对照组和0.1 μg/mL脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05).对照组和0.1、1.0、10.0、20.0μg/mL脂多糖组CD54+ EMP数量水平分别为(4.70±1.01) ×106、(9.20±3.34)×106、(8.83 ±1.70) ×106、(17.18±3.78) ×106、(17.73 ±4.98)×106,组间比较差异有统计学意义(F=3.35,P＜0.05).与对照组比较,10.0、20.0 μg/mL脂多糖组CD54+ EMP数量水平明显升高,差异均有统计学意义(t=-3.19、-3.00,P值均小于0.05).对照组和0.1、1.0、10.0、20.0 μg/mL脂多糖组CD144+ EMP数量水平分别为(3.93 ±1.22) ×106、(6.80±1.36)×106、(8.03 ±2.53) ×106、(17.22±4.52)×106、(11.05±5.80)×106,组间比较差异有统计学意义(F=3.17,P＜0.05).10.0 μg/mL脂多糖组CD144+ EMP数量水平高于对照组及0.1、1.0 μg/mL脂多糖组,差异均有统计学意义(P值均小于0.05).20.0μg/mL脂多糖组CD62E+ EMP数量水平为(2.95±0.26)×106,明显高于对照组(1.26 ±0.26)×106,差异有统计学意义(t=-4.45,P＜0.05).各组内皮细胞凋亡率比较差异无统计学意义(F=0.17,P＞0.05).结论 脂多糖损伤内皮细胞可表现为表达特异性标记的EMP的大量释放,可能是脓毒症内皮细胞损伤机制之一.

关键词：脂多糖类、内皮细胞、脐静脉、微粒

所属期刊栏目：12

分类号：R-3;S43

资助基金：上海市航空医疗救援基地医院建设与应用项目

在线出版日期：2017-06-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：103-108