10.3877/cma.j.issn.1673-9450.2016.04.004
硫化氢对烧伤大鼠创面巨噬细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶体系的影响
目的 应用外源性硫化氢(H2S)干预烧伤大鼠,探讨H2S对其创面巨噬细胞硫化氢/胱硫醚-γ-裂解酶(H2S/CSE)体系的作用.方法 取78只健康SD大鼠,随机选取6只大鼠作为正常对照组,其余大鼠(烧伤组)按照随机数字表法又分为4组,0.9%氯化钠溶液组,硫氢化钠(NaHS,体外H2S供体)组,炔丙基甘氨酸(PPG,H2S合成酶抑制剂)组,NaHS+ PPG组,每组18只.正常对照组不做任何干预,烧伤组大鼠均制成5% TBSA深Ⅱ度烧伤创面,0.9%氯化钠溶液组、NaHS组、PPG组及PPG+NaHS组分别给予每天1次定时腹腔注射0.9%氯化钠溶液0.002 mL/g、NaHS56 μmol/kg、PPG 45 mg/kg及NaHS 56 μmol/kg+ PPG 45 mg/kg,分别在干预后3、7、14 d处死大鼠,分离、提取并培养创面巨噬细胞(每个时相点随机选取6只大鼠);正常对照组大鼠直接处死,取正常皮肤巨噬细胞培养.用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定对烧伤组大鼠创面巨噬细胞(正常对照取组大鼠正常皮肤巨噬细胞)培养上清液中炎H2S的浓度;采用实时定量PCR检测其巨噬细胞中胱硫醚-γ-裂解酶mRNA (CSEmRNA),多组间数据比较采用单因素方差分析,相同时相点各组间两两比较采用SNK-q检验.结果 在干预后3、7、14 d,细胞培养上清液中H2S的浓度,0.9%氯化钠溶液组、NaHS组、PPG组、NaHS+ PPG组组间比较,差异有统计学意义(F=34.657、23.532、15.985,P值均小于0.05);干预后3、7、14 d,NaHS+PPG组[(60.74±1.21)、(54.27±1.15)、(54.27±1.16) μmol/L]与NaHS组[(98.29±1.43)、(91.82±1.26)、(87.93±1.30) μmol/L]比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05),与PPG组[(52.98±1.20)、(54.27±1.02)、(52.98±1.14) μmol/L]比较,差异均无统计学意义(P值均大于0.05).巨噬细胞中CSEmRNA变化情况,0.9%氯化钠溶液组、NaHS组、PPG组、NaHS+ PPG组组间比较,差异有统计学意义(F=8.547、7.162、6.565,P值均小于0.05);在干预后3、7、14 d,NaHS+ PPG组(0.195 ±0.002、0.265±0.004、0.325 ±0.003)与NaHS组(0.334±0.007、0.329±0.005、0.456±0.002)比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05),与PPG组(0.145±0.001、0.202±0.004、0.245±0.003)比较,差异均有统计学意义(P值均小于0.05).结论 烧伤后大鼠创面巨噬细胞H2S/CSE体系功能降低.微量的外源性H2S对巨噬细胞H2S/CSE体系具有促进作用.PPG能够抑制巨噬细胞内源性H2S的生成,但不能抑制CSE-mRNA的表达.
硫化氢、烧伤、巨噬细胞、胱硫醚γ裂合酶
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R96;R94
国家自然科学基金项目81160237
2017-01-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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