即刻共培养法建立人表皮黑素细胞与角质形成细胞体外共培养模型的实验研究

摘要：

目的 采用即刻共培养的方法建立人表皮黑素细胞与角质形成细胞共培养模型,为研究黑素细胞与角质形成细胞间的相互作用及黑素小体传递机制等后续研究提供简便、快捷、可靠的共培养实验平台.方法 采用即刻共培养和传统共培养两种方法,建立黑素细胞和角质形成细胞两种共培养模型,通过免疫组织化学及免疫荧光法分别对原代黑素细胞及角质形成细胞进行鉴定,倒置显微镜下选取20个高倍镜(200倍)视野,并计数黑素细胞、角质形成细胞数目及黑素细胞树突数目,计算单个高倍镜下黑素细胞与角质形成细胞的比例,统计建立两种共培养细胞模型所需时间,并运用两独立样本t检验进行比较分析.结果 两种方法都可以建立黑素细胞与角质形成细胞的共培养模型,即刻共培养法中每个黑素细胞平均树突数目(2.63±0.26)个,较传统培养法树突数目(2.46±0.17)个多,差异有统计学意义(=2.44,P＜0.05);即刻共培养方法中角质形成细胞与黑素细胞的比例为2.84±0.64,传统共培养组中两者比例为2.08 ±0.49,比较差异有统计学意义(t=4.22,P＜0.05);即刻共培养法与传统培养法的建模时间分别为(4.00±0.73)d、(19.10 ±0.83)d,比较差异有统计学意义(t=61.24,P＜0.05).结论 与传统方法相比,即刻共培养法建立原代共培养模型速度快,细胞比例适宜,黑素细胞树突数目较多,更加适合用于黑素细胞与角质形成细胞间相互作用机制及黑素小体传递机制的后续研究.

关键词：黑素细胞、角质形成细胞、即刻共培养、传统共培养

所属期刊栏目：10

分类号：R32;R73

资助基金：国家自然科学基金面上项目81372051;总参军事医学和老年病科研基金项目ZCWS14B06;首都特色基金Z151100004015199;解放军第三○九医院院管课题2014MS-001

在线出版日期：2016-04-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：9-13