血管紧张素Ⅱ对人脐带间充质干细胞生物学特性的影响

摘要：

目的 体外观察不同浓度血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)对人脐带间充质干细胞(hUCMSC)凋亡、增殖和旁分泌的影响,筛选适宜浓度Ang-Ⅱ预处理hUCMSC.方法 照笔者单位实验室建立的方法,体外分离、培养并鉴定hUCMSC,取3～8代hUCMSC接种于培养板,将细胞按随机数字表法分为4组(每组3个复孔):空白对照组、100 ng/mL Ang-Ⅱ组、500 ng/mL Ang-Ⅱ组及1000 ng/mLAng-Ⅱ组,后3组分别于含有100ng/mL、500 ng/mL及1000 ng/mL Ang-Ⅱ的培养基、空白对照组使用不含有Ang-Ⅱ的培养基培养,各组于培养24、48、72 h后分别于倒置显微镜镜下观察细胞形态和细胞融合的情况,吖啶橙/溴化乙锭(AO/EB)染色法检测细胞凋亡情况,CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞仪检测细胞周期(S期),酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组细胞上清液中血管内皮生长因子(VEGF)、成纤维细胞生长因子(bFGF)、肝细胞生长因子(HGF)的含量.结果 培养24、48、72 h后,倒置显微镜下观察各组细胞形态类似,均呈长梭形,少数细胞呈多角形,100 ng/mL Ang-Ⅱ组细胞的融合率分别为40％ ～ 45％、70％～80％、90％～95％,融合速度显著增加.AO/EB结果显示:仅100 ng/mL Ang-Ⅱ组与空白对照组未出现凋亡细胞或死亡细胞.CCK-8的结果同样显示100 ng/mLAng-Ⅱ组细胞增殖速度显著快于空白对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).流式细胞仪检测结果显示为100 ng/mL Ang-Ⅱ组所处的增殖周期(S)期细胞数量的比例显著增加.ELISA检测结果是100 ng/mL Ang-Ⅱ组细胞的VEGF、bFGF、HGF含量最高,与空白对照组比较,差异均有统计学意义(P均小于0.05).结论 100 ng/mL Ang-Ⅱ具有抑制细胞凋亡,促进细胞增殖的功能,这可能与其使hUCMSC大量分泌VEGF、bFGF、HGF有关.

关键词：血管紧张素Ⅱ、脐带、间质干细胞、细胞增殖、细胞凋亡、旁分泌

所属期刊栏目：10

分类号：R44;R97

资助基金：国家自然科学基金面上项目81372052

在线出版日期：2016-03-02（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：20-25