脂肪间充质干细胞对严重烧伤大鼠早期心肌损伤的保护作用

摘要：

目的 探讨脂肪间充质干细胞(ADSC)对严重烧伤大鼠早期心肌损害的作用及相关作用机制.方法 (1)取6只健康雄性SD大鼠双侧腹股沟脂肪组织,采用胶原酶消化法培养大鼠ADSC,流式细胞仪检测细胞表面分子标记物,并进行成骨、成脂诱导分化鉴定.(2) 18只健康雄性SD大鼠,按照随机数字表法分为假伤组、单纯烧伤组、ADSC治疗组(每组各6只大鼠).单纯烧伤组、ADSC治疗组大鼠背部于95℃热水浴15 s,制成30％总体表面积Ⅲ度烧伤,伤后即刻2组大鼠分别腹腔注射0.9％氯化钠10 mL(50 mL/kg)抗休克,3h后经尾静脉注射0.9％氯化钠溶液和ADSC;假伤组大鼠仅背部于37℃水浴18s模拟烧伤过程.均于处理后48 h收集3组大鼠心肌组织标本及腹主动脉血,酶联免疫吸附没定法检测血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)含量,实时荧光定量RT-PCR法检测组织中半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-3(caspase-3)、肿瘤坏死因α(TNF-α)、白细胞介素(IL-1β)、IL-10的mRNA表达水平.对数据行单因素方差分析、LSD-t检验.结果 (1)分离培养的ADSC传至第三代时形态规则,经流式细胞仪检测,所培养的ADSC均表达CD29、CD90、CD105,阳性率分别为88.6％、99.7％、92.8％,而CD31、CD34、CD45阳性率分别为4.4％、4.7％、3.3％;经诱导培养后可向成骨成脂分化.(2)单纯烧伤组大鼠血清CK、LDH含量分别为(1963.72±642.33)、(2732.45±215.13)U/L,高于假伤组的(347.77±72.33)、(825.36±94.26) U/L(t值分别为12.322、17.244,P值均小于0.05).ADSC处理组CK、LDH含量(1163.09±135.47)、(2069.24±152.46) U/L低于单纯烧伤组(t值分别为-8.757、-6.556,P值均小于0.05).(3)单纯烧伤组大鼠心肌组织中caspase-3、TNF-α、IL-1β的mRNA表达量分别为2.68±0.43、2.22±0.31、2.57 ±0.19,高于假伤组的1.00±0.05、1.00±0.09、1.00±0.08、(t值分别为13.242、8.651、14.332,P值均小于0.05).ADSC处理组大鼠心肌组织中caspase-3、IL-1β、TNF-α的mRNA表达量1.41±0.08、1.37±0.05、1.12±0.04低于单纯烧伤组(t值分别为-11.257、-7.990、15.248,P值均小于0.05).单纯烧伤组大鼠心肌组织中IL-10的mRNA表达量为0.43 ±0.02,低于假伤组的1.00±0.05 (t=8.768,P＜0.05);ADSC处理组大鼠心肌组织中IL-10的mRNA表达量为0.61±0.03,高于假伤组(t=11.446,P ＜0.05).结论 ADSC可显著降低CK、LDH水平,减轻心肌组织损伤,减少心肌细胞凋亡,降低炎症因子IL-1β和TNF-α表达、促进抑炎因子IL-10的表达,对严重烧伤大鼠心脏损伤具有保护作用.

关键词：烧伤、心肌、间质干细胞、细胞治疗

所属期刊栏目：10

分类号：R32;R59

资助基金：国家自然科学基金81372056

在线出版日期：2015-12-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：4-8