神经干细胞联合依达拉奉对氧糖剥夺-再灌注皮层神经元的保护作用及机制探讨

摘要：

目的:探讨神经干细胞联合依达拉奉治疗对氧糖剥夺-再灌注（OGD-R）皮层神经元的保护作用及可能机制。方法:（1）体外培养胎龄14~16 d的SD胎鼠脑组织神经干细胞，采用免疫荧光染色检测巢蛋白、神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、微管相关蛋白2（MAP2）的表达进行鉴定。原代培养新生24 h内SD大鼠皮层神经元，采用免疫荧光染色检测神经元特异性核蛋白（NeuN）、β-微管蛋白（β-Tubulin）的表达进行鉴定。（2）将原代培养的皮层神经元分为正常组（正常培养）、OGD-R模型组（缺氧处理1.5 h后再复氧培养24 h）、OGD-R+神经干细胞组（缺氧处理1.5 h后再复氧培养时，加入神经干细胞与皮层神经元共培养24 h）、OGD-R+依达拉奉组（缺氧处理前加入100 μmol/L依达拉奉，缺氧处理1.5 h后再复氧培养24 h）、OGD-R+神经干细胞组+依达拉奉组（缺氧处理前加入100 μmol/L依达拉奉，缺氧处理1.5 h后再复氧培养时，加入神经干细胞与皮层神经元共培养24 h），24 h后采用细胞计数试剂盒-8（CCK-8）检测各组神经元的增殖，流式细胞仪检测神经元凋亡率，酶联免疫吸附实验（ELISA）检测神经元上清中白细胞介素（IL）-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量，实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）、Western blotting实验分别检测神经元Notch1、Hes1、Hes5 mRNA及蛋白的表达。结果:（1）免疫荧光染色检测结果显示神经干细胞球巢蛋白、GFAP、MAP2阳性，皮层神经元NeuN及β-Tubulin阳性，均鉴定成功。（2）与正常组比较，OGD-R模型组、OGD-R+神经干细胞组、OGD-R+依达拉奉组神经元细胞存活率减低、凋亡率增加、上清中IL-1β及TNF-α含量升高、Notch1 mRNA及蛋白的表达升高，差异均有统计学意义（
P<0.05）。与OGD-R模型组比较，OGD-R+神经干细胞组+依达拉奉组神经元细胞存活率升高、凋亡率减少、上清中IL-1β及TNF-α含量减低、Hes1和Hes5 mRNA及蛋白的表达均降低，OGD-R+依达拉奉组、OGD-R+神经干细胞+依达拉奉组神经元Notch1 mRNA及蛋白表达降低，差异均有统计学意义（
P<0.05）。
结论:神经干细胞联合依达拉奉治疗可以逆转OGD-R导致的神经元损伤，可能是通过抑制炎性因子和Notch信号通路上关键信号分子Notch1、Hes1、Hes5的表达来发挥作用。

关键词：神经干细胞、依达拉奉、皮层神经元、氧糖剥夺-再灌注

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资助基金：山西省基础研究项目202103021224404;太原钢铁（集团）有限公司总医院院级课题项目202107;Shanxi Province Basic Research Project202103021224404;General Hospital of Taiyuan Iron and Steel's Group CO., LTD Hospital-Level Project202107

在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：918-922