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摘要: 目的:探讨黄芪甲苷是否通过锌离子(Zn
2+)调控线粒体相关内质网膜(MAMs)发挥神经保护作用,并阐明可能的机制。
方法:常规培养PC12细胞并分为7组。对照组:细胞常规培养;2-DG组:用50 μmol/L 2-DG处理30 min;黄芪甲苷+2-DG组:用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min;黄芪甲苷组:用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min;TPEN+黄芪甲苷+2-DG组:用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min,接着用50 μmol/L 2-DG处理30 min;TPEN组:10 μmol/L TPEN处理10 min;TPEN+2-DG组:用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min。通过Western blotting实验检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8、B细胞受体相关蛋白31(Bap31)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达,采用Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平,采用免疫荧光法检测Fis1蛋白的表达,采用线粒体荧光探针TMRE检测线粒体通透性转移孔(mPTP)开放情况。结果:(1)与对照组相比,2-DG组GRP78、GRP94、Caspase-8、Bap31、Fis1蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增加;与2-DG组相比,黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显降低;与黄芪甲苷+2-DG组相比,TPEN+黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增强;差异均有统计学意义(
P<0.05)。(2)与对照组相比,2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强;与2-DG组相比,黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显减弱;与黄芪甲苷+2-DG组相比,TPEN+黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强;与对照组相比,TPEN+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强;差异均有统计学意义(
P<0.05)。(3)与对照组相比,2-DG组TMRE荧光强度明显减弱;与2-DG组相比,黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显增强;与黄芪甲苷+2-DG组相比,TPEN+黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱;与对照组相比,TPEN+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱;差异均有统计学意义(
P<0.05)。
结论:黄芪甲苷能够通过Zn
2+抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡,阻止mPTP开放发挥神经保护作用,其作用机制可能与Fis1、Bap31表达有关。
关键词: 黄芪甲苷、缺血再灌注损伤、锌离子、细胞凋亡
所属期刊栏目: 22
资助基金: 国家自然科学基金82270303;河北省自然科学基金H2020209172、H2021209061;河北省教育厅项目ZD2020110;唐山市高层次人才项目A202006016;National Natural Science Foundation of China82270303;Natural Science Foundation of Hebei ProvinceH2020209172, H2021209061;Education Department of Hebei ProvinceZD2020110;Talent Project in Tangshan of Hebei ProvinceA202006016
在线出版日期: 2024-01-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
页数: 共9页
页码: 566-574
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