黄芪甲苷通过锌离子抑制内质网应激发挥PC12细胞神经保护作用

摘要：

目的:探讨黄芪甲苷是否通过锌离子(Zn
2+)调控线粒体相关内质网膜(MAMs)发挥神经保护作用，并阐明可能的机制。
方法:常规培养PC12细胞并分为7组。对照组：细胞常规培养；2-DG组：用50 μmol/L 2-DG处理30 min；黄芪甲苷+2-DG组：用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min；黄芪甲苷组：用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min；TPEN+黄芪甲苷+2-DG组：用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L黄芪甲苷处理20 min，接着用50 μmol/L 2-DG处理30 min；TPEN组：10 μmol/L TPEN处理10 min；TPEN+2-DG组：用10 μmol/L TPEN处理10 min后再用50 μmol/L 2-DG处理30 min。通过Western blotting实验检测葡萄糖调节蛋白(GRP)78、GRP94、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)-8、B细胞受体相关蛋白31(Bap31)、线粒体分裂蛋白1(Fis1)的表达，采用Annexin V-FITC/PI试剂盒检测细胞凋亡水平，采用免疫荧光法检测Fis1蛋白的表达，采用线粒体荧光探针TMRE检测线粒体通透性转移孔(mPTP)开放情况。结果:(1)与对照组相比，2-DG组GRP78、GRP94、Caspase-8、Bap31、Fis1蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增加；与2-DG组相比，黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显降低；与黄芪甲苷+2-DG组相比，TPEN+黄芪甲苷+2-DG组上述5种蛋白表达以及Annexin V-FITC/PI染色的绿色荧光强度明显增强；差异均有统计学意义(
P<0.05)。(2)与对照组相比，2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强；与2-DG组相比，黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显减弱；与黄芪甲苷+2-DG组相比，TPEN+黄芪甲苷+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强；与对照组相比，TPEN+2-DG组Fis1蛋白荧光强度明显增强；差异均有统计学意义(
P<0.05)。(3)与对照组相比，2-DG组TMRE荧光强度明显减弱；与2-DG组相比，黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显增强；与黄芪甲苷+2-DG组相比，TPEN+黄芪甲苷+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱；与对照组相比，TPEN+2-DG组TMRE荧光强度明显减弱；差异均有统计学意义(
P<0.05)。
结论:黄芪甲苷能够通过Zn
2+抑制内质网应激诱导的PC12细胞凋亡，阻止mPTP开放发挥神经保护作用，其作用机制可能与Fis1、Bap31表达有关。

关键词：黄芪甲苷、缺血再灌注损伤、锌离子、细胞凋亡

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在线出版日期：2024-01-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：566-574