中性粒细胞对小鼠蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中细胞焦亡的作用及其机制研究

摘要：

目的:探讨中性粒细胞对小鼠蛛网膜下腔出血(SAH)后早期脑损伤(EBI)中细胞焦亡的作用及其潜在机制。方法:将76只雄性C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为假手术组、SAH组、SAH+溶剂组及SAH+anti-ly6G组，每组19只。后3组小鼠采用改良线栓穿刺法制备成SAH模型，其中SAH+溶剂组及SAH+anti-ly6G组小鼠分别于造模前24 h经静脉注射生理盐水或anti-ly6G(4 mg/kg)。造模后24 h时分别对各组小鼠采用免疫荧光染色检测大脑皮层中性粒细胞、消皮素D(GSDMD)、S100钙结合蛋白A8(S100A8)的表达及定位情况，FJC染色检测皮层神经元损伤情况，改良加西亚评分及转棒实验评估神经功能，脑组织含水量检测评估脑水肿情况，Western blotting检测皮层组织中S100A8、Toll样受体4(TLR4)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、活化半胱氨酸蛋白酶1(cleaved-caspase1)和活化消皮素D(GSDMD-N)的蛋白表达情况。结果:(1)与假手术组相比，SAH组小鼠损伤侧皮层中出现中性粒细胞浸润，中性粒细胞中有S100A8大量表达，且相同区域内GSDMD表达升高并均能与星形胶质细胞、小胶质细胞及神经元共定位。(2)与假手术组相比，SAH组和SAH+溶剂组小鼠损伤侧皮层中性粒细胞浸润数量和FJC阳性神经元数量均明显增多，改良加西亚评分和转棒实验中掉落时间均明显降低，脑组织含水量明显增高，S100A8、TLR4、NLRP3、cleaved-caspase1和GSDMD-N的蛋白表达均明显升高，差异均有统计学意义(
P<0.05)。与SAH组和SAH+溶剂组相比，SAH+anti-ly6G组小鼠损伤侧皮层中性粒细胞浸润数量和FJC染色阳性神经元数量均明显减少，改良加西亚评分和转棒实验中掉落时间均明显增加，脑组织含水量明显降低，S100A8、TLR4、NLRP3、cleaved-caspase1和GSDMD-N的蛋白表达均明显下降，差异均有统计学意义(
P<0.05)。
结论:抑制中性粒细胞可下调SAH后S100A8的表达，从而减弱TLR4/NLRP3激活介导的细胞焦亡，有利于改善EBI。

关键词：蛛网膜下腔出血、早期脑损伤、中性粒细胞、细胞焦亡

所属期刊栏目：22

资助基金：国家自然科学基金81974178、82001300;西藏自治区"组援医学项目"基金XZ2020ZR-ZY56（Z）;National Natural Science Foundation of China81974178, 82001300;Natural Science Foundation of Tibet Autonomous Region Group Type Aid Tibet Medical ProjectXZ2020ZR-ZY56[Z]

在线出版日期：2023-05-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共9页

页码：18-26