10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2020.01.003
脑源性微囊泡对脐静脉内皮细胞骨架的影响研究
目的 探讨脑源性微囊泡(BDMVs)对脐静脉内皮细胞骨架的影响. 方法 体外制备BDMVs,并予透射电镜观察及粒径检测.将PKH26荧光染料标记的BDMVs与脐静脉内皮细胞共培养0.5h、1h、2h后,应用流式细胞术检测不同时间点的脐静脉内皮细胞吞噬BDMVs情况.将体外常规培养的脐静脉内皮细胞分为对照组、BDMVs组(另入终浓度1.5×107/mL的BDMVs处理细胞)及尼莫地平组[予2 μg尼莫地平(0.2 mg/mL)预处理10 min后加入终浓度1.5×107/mL的BDMVs处理细胞],应用激光共聚焦显微镜观察罗丹明标记鬼笔环肽染色后各组脐静脉内皮细胞中纤维型肌动蛋白的荧光强度及应力纤维数目. 结果 透射电镜下可见体外制备的BDMVs具有完整的膜结构,粒径范围为100-1000nm.流式细胞术检测显示,吞噬BDMVs的脐静脉内皮细胞比例随培养时间的延长呈时间依赖性升高(0.5 h:22.7%±1.2%;1 h:52.3%±1.3%;2 h:71.6%±1.9%),各时间点间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05).激光共聚焦显微镜观察显示,与对照组相比,BDMVs组中纤维型肌动蛋白的荧光强度明显升高且应力纤维数目明显增多增粗;而与BDMVs组相比,尼莫地平组中纤维型肌动蛋白的荧光强度明显降低且应力纤维数目明显减少变细. 结论 脐静脉内皮细胞吞噬BDMVs的作用随时间延长而增强,且吞噬BDMVs后可导致细胞骨架重构,而尼莫地平可部分阻断该作用.
脑源性微囊泡、脐静脉内皮细胞、细胞骨架
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国家自然科学基金;National Natural Science Foundation of China
2020-04-24(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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